【摘 要】
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目的:构建携带小鼠Toll样受体2(TLR2)编码基因的重组慢病毒,并在人胚肾上皮细胞系HEK293T(简称293T)细胞中验证重组慢病毒TLR2基因的表达.方法:根据小鼠TLR2编码基因序列,构建含有小鼠TLR2编码基因的重组表达质粒(pCDH-CMV-TLR2-EF1a-GFP-puro),并对阳性克隆进行酶切和测序鉴定.TLR2重组质粒经慢病毒包装、扩增、浓缩获得TLR2重组慢病毒.以慢病毒液感染293 T细胞以验证TLR2基因的表达.结果:获得携带小鼠TLR2基因的重组慢病毒,并成功在293 T细
【机 构】
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武汉大学基础医学院人体解剖学教研室 & 湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室,湖北武汉 430071
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目的:构建携带小鼠Toll样受体2(TLR2)编码基因的重组慢病毒,并在人胚肾上皮细胞系HEK293T(简称293T)细胞中验证重组慢病毒TLR2基因的表达.方法:根据小鼠TLR2编码基因序列,构建含有小鼠TLR2编码基因的重组表达质粒(pCDH-CMV-TLR2-EF1a-GFP-puro),并对阳性克隆进行酶切和测序鉴定.TLR2重组质粒经慢病毒包装、扩增、浓缩获得TLR2重组慢病毒.以慢病毒液感染293 T细胞以验证TLR2基因的表达.结果:获得携带小鼠TLR2基因的重组慢病毒,并成功在293 T细胞系表达.结论:成功构建表达小鼠TLR2基因的重组慢病毒,为后期研究TLR2分子在免疫细胞中的作用及信号传导提供了基础.
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目的:研究长链非编码RNA CASC2在肝癌中的表达及其临床意义,并探讨其作用机制.方法:采用RT-PCR检测42例肝癌患者肿瘤组织中CASC2的表达水平,分析CASC2表达对肝癌患者各临床病理参数和预后的影响.通过细胞转染建立CASC2过表达的肝癌细胞系,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活性,T ransw ell法检测细胞迁移和侵袭能力.双荧光素酶实验验证CASC2与miR-221的相互作用.并采用RT-PCR检测各组细胞和肝癌组织中miR-221的表达水平.在CASC2组细胞中过表达miR-221
为了分析细菌16S rRNA基因可变区与其全长序列之间进化关系的相似性,对核糖体数据库项目(RDP)所提供的细菌16S rRNA基因进行了研究.在对可变区进行截取、筛选等数据预处理后,对可变区实际碱基数目和操作分类单元数目进行了统计分析.结果显示,V2、V3、V4可变区,特别是V2、V4可变区,不仅在序列长度上较长,实际碱基数目也大大超过其他可变区,较其他可变区包含更多的序列信息;建立了层次距离矩阵算法,计算出V2、V3、V4可变区与全长序列所构建的进化树之间的距离差异值分别为59052、87154、45
高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)可诱发女性宫颈癌,HPV45是HPV主要高危亚型之一,L1蛋白是主要的保护性蛋白.以大肠杆菌表达、纯化获得的重组蛋白SUMO-45 L1作为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗HPV45 L1蛋白的单克隆抗体,并以单克隆抗体3C11为靶分子,使用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行亲和淘选,三轮筛选后挑选12个与单抗3C11反应较强的克隆进行测序并分析.结果表明,噬菌体所展示的氨基酸序列与HPV45 L1蛋白序列“381VPNTYD386”相同,
目的:分析胡蜂蛰伤患者发生急性肾损伤(AKI)的影响因素,为临床早期诊断和治疗提供参考.方法:回顾性分析我院2014年1月-2020年9月救治的217名胡蜂蜇伤患者,收集患者的临床资料和实验室检查结果.采用Logistic回归分析其影响因素,采用受试者工作(ROC)曲线分析影响因素的诊断预测价值.结果:通过Logistic回归分析筛选出胡蜂蛰伤导致AKI的独立影响因素为蛰伤至就诊时长,丙氨酸转氨酶(ALT)、白细胞(WBC)、肌酸激酶(CK)和肌红蛋白(Myo)值,以上因素均与AKI的发生呈正相关(均P
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目的:探讨RNA结合蛋白8A(RBM8A)在乳腺癌中的表达及预后作用,分析其在乳腺癌中与肿瘤免疫浸润的相关性.方法:TIMER、GEPIA分析RBM8A在泛癌中表达.UALCAN分析RBM8A与乳腺癌肿瘤类型、分期、淋巴结转移的相关性,HPA分析RBM8A蛋白在乳腺癌中的表达情况,Kaplan-Meier、PrognoScan分析RBM8A对乳腺癌的临床预后意义.LinkedOmics、cBioPortal、GEPIA分析乳腺癌中RBM8A共表达基因,Metascape对RBM8A及共表达基因行GO、KE
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