【摘 要】
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利用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)建立巨大芽孢杆菌L2中芥酸酰胺的测定方法,采用单因素试验和响应面法对其培养基成分和发酵条件进行研究.通过Design-Expert 8.06对蛋白胨添加量、温度、pH值进行三因素响应面试验设计,以芥酸酰胺产量为响应值,最后进行响应面分析.在GC-MS色谱条件下,芥酸酰胺含量与峰面积呈现良好线性关系(R2=0.9974),精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(RSD)均低于10％,回收率82.78％～98.14％,测得巨大芽孢杆菌发酵液样品中芥酸酰胺含量为0.940 m
【机 构】
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贵州大学 生命科学学院/农业生物工程研究院 山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室山地生态与农业生物工程协同创新中心,贵阳550025;贵州省产品质量检验检测院,贵阳550003
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利用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)建立巨大芽孢杆菌L2中芥酸酰胺的测定方法,采用单因素试验和响应面法对其培养基成分和发酵条件进行研究.通过Design-Expert 8.06对蛋白胨添加量、温度、pH值进行三因素响应面试验设计,以芥酸酰胺产量为响应值,最后进行响应面分析.在GC-MS色谱条件下,芥酸酰胺含量与峰面积呈现良好线性关系(R2=0.9974),精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(RSD)均低于10％,回收率82.78％～98.14％,测得巨大芽孢杆菌发酵液样品中芥酸酰胺含量为0.940 mg/L.在葡萄糖浓度为5 g/L、蛋白胨添加量为16.40 g/L、NaCl添加量为3 g/L、接种量为2.0％、培养温度为34.8℃、摇床转速为150 r/min、初始pH值为5.80的最优培养条件下,芥酸酰胺产量为1.325 mg/L,比优化前提高了39.03％.结果可对巨大芽孢杆菌发酵液中芥酸酰胺的含量测定提供参考依据,获得芥酸酰胺产量明显提高的巨大芽孢杆菌L2发酵培养基和发酵条件,为芥酸酰胺的后续研究提供理论基础.
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