【摘 要】
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目的：建立用糖基工程酵母制备流感血凝素的方法 ,研究其免疫原性,为酵母表达流感疫苗提供基础。方法：通过PCR的方法扩增编码H1N1流感病毒血凝素HA1（1～330 aa）的基因片段,将HA1基因
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,沈阳药科大学生命科学与生物制药学院
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目的：建立用糖基工程酵母制备流感血凝素的方法 ,研究其免疫原性,为酵母表达流感疫苗提供基础。方法：通过PCR的方法扩增编码H1N1流感病毒血凝素HA1（1～330 aa）的基因片段,将HA1基因克隆到表达载体pPIC9质粒上,电转化到糖基工程酵母中,甲醇诱导表达并用镍亲和层析柱纯化重组蛋白,N-糖苷酶F（PNGF）酶切分析N-糖链,Western印迹验证纯化蛋白,免疫小鼠并测定HA1诱导抗体的滴度。结果：获得HA1基因的酵母重组表达菌株,SDS-PAGE分析可见野生型GS115表达的重组HA1相对分子质量
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