【摘 要】
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目的 获取系列鼠抗人CD分子单抗的轻链及重链可变区基因并进行克隆和测序。方法 采用RT-PCR技术,从WuT4、WUT3、WuTac、WuLCA、WuT9杂交瘤细胞总RNA中分别扩增出轻链和重链可变
【机 构】
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武汉生物制品研究所; 武汉生物制品研究所 武汉430060; 武汉430060;
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目的 获取系列鼠抗人CD分子单抗的轻链及重链可变区基因并进行克隆和测序。方法 采用RT-PCR技术,从WuT4、WUT3、WuTac、WuLCA、WuT9杂交瘤细胞总RNA中分别扩增出轻链和重链可变区基因,进行克隆并作核苷酸序列分析。结果 以上几种抗体的轻重链可变区的 PCR产物大小均为 400bp左右,成功构建了pMD18-T-VL和 pMD18-T-VH克隆载体,经限制性酶切分析,其大小与预期结果相符,并按ABI PRLSM BigDye系统测序。结论 经与Kabat、Blast抗体基因同源数据库比较,所获基因片段均为抗体基因。
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