【摘 要】
:
为提高重组抗菌肽Plectasin的表达量,对构建的Plectasin重组表达载体p E-SUMO-PS的表达条件进行正交试验优化。根据Plectasin氨基酸序列合成了Plectasin基因,通过限制性内切
【机 构】
:
南方医科大学珠江医院呼吸内科; 南方医科大学公共卫生与热带医学学院三级生物安全实验室;
【基金项目】
:
广东省教育部产学研结合资助项目(No.2010B090400540);2011年广东省大学生创新实验资助项目(No.1212111003);2012年国家级大学生创新创业训练计划资助项目(No.201212121080)
论文部分内容阅读
为提高重组抗菌肽Plectasin的表达量,对构建的Plectasin重组表达载体p E-SUMO-PS的表达条件进行正交试验优化。根据Plectasin氨基酸序列合成了Plectasin基因,通过限制性内切酶Xba I和Bsa I插入表达载体p E-SUMO中,转化E.coli Origami(DE3),IPTG诱导表达。选取诱导时间,诱导浓度和诱导温度共3个主要外部因素。采用3因素3水平正交试验设计,通过SDS-PAGE测定重组表达蛋白。以标准SDS-PAGE图法分析目的融合蛋白含量,以单位上清体积内融合蛋白量作为检测指标,结果用SPSS13.0软件进行统计分析。实验成功构建了重组表达载体p E-SUMO-PS,且融合蛋白主要是以可溶性蛋白为主。在30℃,0.05 mmol/L IPTG的条件下诱导6 h所得融合蛋白量最大。影响抗菌肽Plectasin融合表达的因素的强度由高到低分别为诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度。通过正交试验得出抗菌肽Plectasin原核表达的最佳诱导条件为30℃,6 h和0.05 mmol/L IPTG。这对于抗菌肽Plectasin的后续纯化及产业化具有重要参考价值。
其他文献
梅毒是由梅毒螺旋体所致,具有高度传染性的性传播疾病。可分为显性梅毒和隐性梅毒,隐性梅毒潜伏期可长达数十年。产科护理人员,特别是助产士与病人接触最多,易受感染。故加强产科
随着社会的不断发展,房屋建筑工程的规模也相应逐渐扩大,同时,房屋建筑施工工艺也愈趋复杂,在此形势下,房屋建筑业快速发展的过程中,保证建筑工程的施工质量是最应该注意的问
目的分析2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法选取2015年2月—2016年2月在新疆医科大学第五附属医院治疗
目的探讨目前护理人员对法律知识的了解程度,明确护理人员法律知识的培训方向.方法应用自设的调查表,向全院护理人员发调查问卷341份,了解护理人员对法律知识掌握情况.结果全
基于系统的线性化模型,利用线性反馈矩阵对模糊控制器输入变量进行了综合,所设计的简化模糊控制系统同时实现了摆杆角度和小车位移的稳定控制.仿真结果表明,该方法是有效可行的,并
随着人类视觉历史的演进和发展,西方造型艺术对客观世界的感知也产生着由表及里的变化,而我们研究视觉现象和视觉世界的观念和知识经验都在不断改变中.媒材与技艺问题不仅是
以混凝土预制构件为主要构件,经装配、连接而成的建筑即为预制装配式建筑,这一类型的建筑不仅施工工期短、整体精度较高,且与当下所推行的绿色建筑理念相符合,具有能耗低等优
目的探讨血清S100B蛋白水平在早发精神分裂症患儿中的表达及意义。方法方便选择2015年5月—2016年1月间河南省精神病医院收治的90例早发精神分裂症患儿为观察组,同期72名健康
<正> 胎儿心律失常(Fetal Arrhythmial)是一种较常见的胎儿疾病。据报道,胎儿心律失常的发病率约为1%,而一过性者占10%,有临床意义的胎儿心律失常约为1.6%。各种心律失常对胎儿
一个真正优秀的班级应该是一个文化活动频繁、文化领先且具有特色的班级,是一个有凝聚力、有爱萦绕的温馨家园。班级文化是一门潜在的课程,引领着全体同学积极向上、团结进取