探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSC)对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠炎症因子表达的影响。
方法体外培养4周龄SD大鼠BMSC并鉴定成功,取第四代BMSC用于实验,按照随机数字表法将SD大鼠分成3组(每组20只):即假手术(Sham)组、MODS组和BMSC组。MODS组大鼠经大隐静脉注射脂多糖(LPS, 1 mg/kg)制作动物模型,Sham组注射等量磷酸盐缓冲液(PBS),BMSC组在造模后2 h内经尾静脉输注BMSC(1×106 /只, 0.5 mL)。术后72 h观察三组大鼠的存活率并绘制生存曲线;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肺脏、肝脏、心脏组织的病理学改变;血气分析和生化检测评估器官功能;采用蛋白芯片技术检测34种相关炎症因子,筛选差异表达因子,用酶联免疫吸附试验(ELISA)验证差异表达因子。多组定量资料采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,生存曲线差异的比较采用Log-rank检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
结果Sham组、MODS组和BMSC组大鼠生存率分别为100%、60%、80%;生存曲线显示,Sham组的生存率明显大于MODS组及BMSC组(Sham vs. MODS χ2=9.798,P=0.001 7;Sham vs. BMSC χ2=4.333,P=0.037 4);BMSC组的生存率大于MODS组(BMSC vs. MODS χ2=2.408,P=0.120 7),但差异无统计学意义。HE染色结果显示,MODS组肺脏、肝脏、心脏组织充血水肿,炎症细胞浸润,BMSC组组织水肿与炎症细胞浸润减轻;血气分析及生化指标检测显示,与Sham组比较,MODS组pH、PaCO2、乳酸(Lac)的水平明显升高(均P<0.01),总胆红素(TB)明显升高[(0.801±0.501)U/L vs. (2.533±0.382)U/L,P=0.003]及白蛋白(ALB)明显降低[(35.471±4.015)U/L vs. (23.202±4.872)U/L,P<0.01],肌酸激酶(CK)明显升高[(315.670±41.402)U/L vs. (708.250±219.201)U/L,P=0.042];BMSC组各器官功能指标较MODS组明显改善(均P<0.05)。细胞因子蛋白芯片检测示,γ-干扰素(IFN-γ)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)为差异表达因子,ELISA验证结果与其一致:与Sham组比较,MODS组IFN-γ与MCP-1表达均明显升高(均P<0.01);与MODS组比较,BMSC组IFN-γ与MCP-1的表达明显降低(P<0.01)。
结论BMSC可抑制炎症因子IFN-γ和MCP-1的表达来调控MODS大鼠的炎症反应,改善器官功能,促进组织修复,从而提高MODS大鼠的存活率。