骨髓间充质干细胞对多器官功能障碍综合征大鼠炎症因子表达的影响

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目的

探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSC)对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠炎症因子表达的影响。

方法

体外培养4周龄SD大鼠BMSC并鉴定成功,取第四代BMSC用于实验,按照随机数字表法将SD大鼠分成3组(每组20只):即假手术(Sham)组、MODS组和BMSC组。MODS组大鼠经大隐静脉注射脂多糖(LPS, 1 mg/kg)制作动物模型,Sham组注射等量磷酸盐缓冲液(PBS),BMSC组在造模后2 h内经尾静脉输注BMSC(1×106 /只, 0.5 mL)。术后72 h观察三组大鼠的存活率并绘制生存曲线;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肺脏、肝脏、心脏组织的病理学改变;血气分析和生化检测评估器官功能;采用蛋白芯片技术检测34种相关炎症因子,筛选差异表达因子,用酶联免疫吸附试验(ELISA)验证差异表达因子。多组定量资料采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,生存曲线差异的比较采用Log-rank检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

结果

Sham组、MODS组和BMSC组大鼠生存率分别为100%、60%、80%;生存曲线显示,Sham组的生存率明显大于MODS组及BMSC组(Sham vs. MODS χ2=9.798,P=0.001 7;Sham vs. BMSC χ2=4.333,P=0.037 4);BMSC组的生存率大于MODS组(BMSC vs. MODS χ2=2.408,P=0.120 7),但差异无统计学意义。HE染色结果显示,MODS组肺脏、肝脏、心脏组织充血水肿,炎症细胞浸润,BMSC组组织水肿与炎症细胞浸润减轻;血气分析及生化指标检测显示,与Sham组比较,MODS组pH、PaCO2、乳酸(Lac)的水平明显升高(均P<0.01),总胆红素(TB)明显升高[(0.801±0.501)U/L vs. (2.533±0.382)U/L,P=0.003]及白蛋白(ALB)明显降低[(35.471±4.015)U/L vs. (23.202±4.872)U/L,P<0.01],肌酸激酶(CK)明显升高[(315.670±41.402)U/L vs. (708.250±219.201)U/L,P=0.042];BMSC组各器官功能指标较MODS组明显改善(均P<0.05)。细胞因子蛋白芯片检测示,γ-干扰素(IFN-γ)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)为差异表达因子,ELISA验证结果与其一致:与Sham组比较,MODS组IFN-γ与MCP-1表达均明显升高(均P<0.01);与MODS组比较,BMSC组IFN-γ与MCP-1的表达明显降低(P<0.01)。

结论

BMSC可抑制炎症因子IFN-γ和MCP-1的表达来调控MODS大鼠的炎症反应,改善器官功能,促进组织修复,从而提高MODS大鼠的存活率。

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