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目的了解肺炎克雷伯菌的耐药性及耐药基因gyrA的分布，给临床用药提供依据。方法收集2003—2009年临床分离的肺炎克雷伯菌201株，采用琼脂稀释法进行药敏检测；利用引物特异性PCR结合测序识别gyrA基因耐药基因。结果201株肺炎克雷伯菌对甲氧苄啶和氨苄西林有很高的耐药性，但是对亚胺培南和阿米卡星较为敏感；同时，检测到60株占29．9％存在gyrA基因突变。结论随着抗菌药物的大量使用，肺炎克雷伯菌耐药性较严重，易导致肺炎克雷伯菌产生多药耐药性，给临床抗感染治疗带来了严峻的挑战。