【摘 要】
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背景心肌缺血-再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,I/R）是心肌梗死血流再灌注后出现的常见临床问题，自噬在心肌I/R过程中的作用机制尚不完全明确。目的 研究灯盏花素在保护心肌缺血再灌注损伤过程中通过转录因子环腺苷酸反应元件结合蛋白（CREB）促进自噬减轻细胞损伤的机制。方法 在50μmol/L灯盏花素为最佳应答浓度的基础上进行实验。实验分为正常对照（vehicle）
【基金项目】
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国家自然科学基金地区项目（81860236）； 云南省科技厅科技计划项目（202203AC100007）;云南省科技厅-昆明医科大学联合专项基金（202101AY070001-033）； 云南省教育厅项目（2023Y0640）； 昆明医科大学第二附属医院内设项目（2021yk007）；
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背景心肌缺血-再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,I/R）是心肌梗死血流再灌注后出现的常见临床问题，自噬在心肌I/R过程中的作用机制尚不完全明确。目的 研究灯盏花素在保护心肌缺血再灌注损伤过程中通过转录因子环腺苷酸反应元件结合蛋白（CREB）促进自噬减轻细胞损伤的机制。方法 在50μmol/L灯盏花素为最佳应答浓度的基础上进行实验。实验分为正常对照（vehicle）组，缺血-再灌注损伤（I/R）组，灯盏花素处理（Scu+I/R）组及CREB抑制并灯盏花素处理（KG501+Scu+I/R）组。通过糖氧剥夺培养方式建立小鼠心肌细胞I/R模型，MTT法测定细胞活力；生化法测定SOD、MDA、LDH及ATP水平；RT-PCR测定线粒体内膜融合蛋白1（optic atrophy 1,Opal）及线粒体动力相关蛋白1（dynamin-related protein 1,Drpl）表达；Western blots测定LC3、CREB及p-CREB表达。结果 MTT测定发现：相比其他浓度，50μmol/L灯盏花素可显著增加细胞活力，使I/R损伤心肌细胞SOD表达增加（P＜0.01）,MDA表达减少（P＜0.01）,LDH表达减少（P＜0.01）,ATP表达增加（P＜0.01）,LC3Ⅱ/Ⅰ比值增加（P＜0.05）,Drp1（P＜0.01）mRNA表达减少，Opal（P＜0.01）m RNA表达增加，p-CREB/CREB比值增加（P＜0.01）。CREB抑制剂（KG-501）可显著降低灯盏花素处理组的ATP（P＜0.01）、Opal mRNA（P＜0.01）表达，使LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低（P＜0.05），细胞活力降低（P＜0.01）。结论 灯盏花素能够促进缺血心肌细胞自噬，缓解氧化损伤，提高心肌细胞活力。在保护心肌缺血-再灌注损伤过程中，灯盏花素可能通过CREB通路调节自噬作用。
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