目的:利用HPLC-DAD法建立了黄芪中4种主要的异黄酮[毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)、毛蕊异黄酮(Ⅲ)、芒柄花素(Ⅳ)]和黄芪甲苷(Ⅴ)的含量测定方法。方法:样品经AB-8大孔吸附树脂预处理后,利用HPLC-DAD法进行分析,色谱条件为:Sinochrom ODS-AP色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);检测波长:210、254 nm;流速:1.0 mL/min;进样量:10μL;柱温:室温。流动相:二元梯度洗脱(A-水,B-乙腈),梯度条件如下:0～5 min,20%～30%B;5～10 min,30%B;10～17 min,30%～55%B。结果:经方法学评价,5种化合物的线性范围、相关系数良好(r=0.9991～0.9999,n=8);加样回收率试验的RSD均小于3.57%(n=3)。结论:该方法简便、准确、可靠,可用于黄芪药材的质量控制。