【摘 要】
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目的 了解小鼠出生后成纤维细胞激活蛋白(Fap)蛋白在心脏组织中的表达情况以及对其内肽酶活性进行测定.方法 将1天、4天、7天、14天、21天、2月龄C57小鼠心肌组织进行取材,提
【机 构】
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100037北京市 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室;030001山西省太原市 山西医科大学基础医学院
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目的 了解小鼠出生后成纤维细胞激活蛋白(Fap)蛋白在心脏组织中的表达情况以及对其内肽酶活性进行测定.方法 将1天、4天、7天、14天、21天、2月龄C57小鼠心肌组织进行取材,提取RNA和蛋白质,通过qPCR和Western blot方法检测Fap表达;分别通过RIPA裂解法、PBS研磨法和膜蛋白提取试剂盒提取小鼠心脏组织蛋白,测定Fap蛋白内肽酶活性曲线.结果 生理情况下Fap在出生后的发育过程中蛋白表达逐渐升高,离乳后到成年期达到稳定状态;通过三种提取蛋白方法得到的酶活力曲线,确定三种蛋白提取方法对Fap蛋白内肽酶活性的测定无明显差异.结论 在小鼠出生后Fap蛋白在心肌组织中表达量不断升高并在离乳后保持稳定;Fap内肽酶活性不受蛋白提取方法的影响,提示Fap的内肽酶活性中心很稳定.
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