人肠道病毒71型VP4多抗的制备及其应用

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wu19851110
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的制备人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP4多抗,并鉴定EV71空心颗粒(empty particle,EP)和实心颗粒(full particle,FP)。方法构建重组表达质粒p GEX-6p-1-VP4,诱导表达并纯化GST-VP4融合蛋白,免疫家兔制备多抗。ELISA法检测抗体效价,免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)和Western blot法鉴定抗体特异性。应用制备的多抗经Western blot法区分EV71 EP与FP。结果质粒p GEX-6p-1-VP4经双酶切及测序鉴定证明构建正确,纯化后的GST-VP4融合蛋白相对分子质量约32 000,以包涵体形式存在。免疫家兔后可获得效价达10~(10)的多抗。兔抗EV71 VP4多抗可识别EV71原核表达及天然病毒颗粒中的VP0、VP4。结论抗EV71 VP4多抗可应用于EV71 EP及FP的鉴定,为EV71的基础研究及疫苗研发提供了新的工具及方法。 Objective To prepare VP4 polyclonal antibody against enterovirus 71 (EV71) and to identify EV71 empty particle (EP) and full particle (FP). Methods The recombinant plasmid pGEX-6p-1-VP4 was constructed and the GST-VP4 fusion protein was induced and purified. Rabbits were immunized to prepare polyclonal antibody. Antibody titers were detected by ELISA, and antibody specificity was determined by immunofluorescence assay (IFA) and Western blot. The polyclonal antibody was used to distinguish EV71 EP from FP by Western blot. Results The recombinant plasmid pGEX-6p-1-VP4 was verified by double enzyme digestion and sequencing. The constructed recombinant GST-VP4 fusion protein has a relative molecular mass of about 32,000 and exists in the form of inclusion bodies. Immunized rabbits available after the titer of 10 ~ (10) of the polyclonal. The rabbit anti-EV71 VP4 polyclonal antibody can recognize the prokaryotic expression of EV71 and VP0, VP4 in the natural virus particles. Conclusion The anti-EV71 VP4 polyclonal antibody can be used in the identification of EV71 EP and FP, providing new tools and methods for the basic research and vaccine development of EV71.
其他文献
古诗文作品浩如烟海,承载着中华几千年文化的精华,近年来,高中语文教材中文言文篇目的比例逐渐增加,文言文教学也是高中语文教学的重中之重。但是,由于文言文作品距今年代久
生活处处是学问,多多观察,你会发现我们身边隐藏着很多科学知识。厨房是我们每天都会去的地方,让我们一起走进厨房,去探探厨房中隐藏着的物理知识吧。厨房中的能量转换进入厨
父母陪伴子女长大的过程,就像一场漫长旅行。对每个家庭成员尤其是孩子来说,这一路的最大收获不是看到了多少美好风景,而是一家人全身心在一起的每分每秒。  我和先生都是老师,平常工作忙,陪孩子的时间很少,所以每年寒暑假我们都会好好规划,带两个孩子来一次长途旅行。  今年暑假旅行之前,我们和孩子约定:旅途中,不要只顾匆忙赶路看风景,也不能回到酒店就各玩儿各的不交流,而是要保证每天至少有一个小时的家庭娱乐时
目的探索马桑水提取物(CSE)对耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌作用机制。方法分别用AFFX原核表达谱芯片、Western-blotting、SDS-PAGE凝胶电泳等方法,测定CSE对MRSA相关基因
思想政治课是中学素质教育的精髓所在。本文首先介绍了学生需具备的几种思维能力,紧接着提出了政治课程教学中培养学生思维能力的有效策略,望能有助于各位同行开展教学工作。
随着时代在进步社会在发展,人们对健康和美的意识的追求也在不断的提高,初中阶段正是人生观价值观发展趋于完整的阶段,对于初中生形成终身体育锻炼的习惯有着很深远的影响。
在一次包络分析的基础上,着重进行了二次包络齿面接触分析,推导出了蜗杆和蜗轮齿面方程。齿面接触分析表明:齿面呈双线接触,润滑条件好,承载能力大,在重型机械传动装置中具有实用价
对动静压滚动混合轴承的工作原理和计算方法进行了论述。该轴承具有较小的摩擦功耗和较好的弹性支承效应。 The working principle and calculation method of dynamic and
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
The Direction of Arrival(DOA) estimation methods for underwater acoustic target using Temporally Multiple Sparse Bayesian Learning(TMSBL) as the reconstructing