【摘 要】
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目的:观察柚皮素对哮喘大鼠气道损伤和炎症反应的影响,并从血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的角度探讨其可能的作用机制。方法:建立卵清蛋白(OVA)诱导大鼠哮喘模型,设置正常对照组、哮喘模型组、柚皮素低(50 mg·kg-1)、中(100 mg·kg-1)、高(200 mg·kg-1)剂量组。柚皮素给药结束后依次麻醉并处死大鼠,取肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)和血液标本;HE染色观察肺组织病
【机 构】
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慈溪市第三人民医院医疗健康集团呼吸危重症科
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目的:观察柚皮素对哮喘大鼠气道损伤和炎症反应的影响,并从血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的角度探讨其可能的作用机制。方法:建立卵清蛋白(OVA)诱导大鼠哮喘模型,设置正常对照组、哮喘模型组、柚皮素低(50 mg·kg-1)、中(100 mg·kg-1)、高(200 mg·kg-1)剂量组。柚皮素给药结束后依次麻醉并处死大鼠,取肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)和血液标本;HE染色观察肺组织病理学变化;Giemsa染色检测BALF中炎性细胞的数量及分类;酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测BALF中辅助性T细胞2(Th2)细胞因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)的含量和血清中血清免疫球蛋白E(IgE)的含量;免疫印迹(WB)检测肺组织中IL-4、IL-13、血管内皮生长因子A(VEGFA)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的表达水平。免疫荧光(IF)定位哮喘大鼠肺部VEGFA蛋白的表达分布。单独用VEGFA或VEGFA和柚皮素同时处理BEAS-2B支气管上皮细胞株后,WB检测IL-4和IL-13表达水平的变化。结果:柚皮素以剂量依赖的模式改善哮喘大鼠肺组织的病理改变,与模型组相比,柚皮素治疗组肺间质增厚和水肿缓解、肺泡结构部分恢复;巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞的浸润减少;Th2细胞因子(IL-4、IL-13和IgE)和VEGF信号通路中VEGFA、VEGFR2蛋白的表达抑制,其中高剂量柚皮素改善效果最为显著。另外,VEGFA单独处理BEAS-2B细胞株后IL-4和IL-13表达上调,而同时用柚皮素处理细胞后,VEGFA的促炎作用明显减弱。结论:柚皮素以剂量依赖的模式改善哮喘大鼠肺组织的病理改变,其潜在机制可能是通过下调VEGF信号通路来抑制Th2型炎症反应介导的。
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