节杆菌β-半乳糖苷酶的分离纯化及酶学性质研究

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分离纯化了由节杆菌所产的β-半乳糖苷酶(EC3.2.1.23)并研究了其酶学性质。以乳糖发酵培养基培养,离心收集菌体,超声破碎细胞得到粗酶液;采用硫酸铵沉淀、Phenyl-Sepharose疏水、DEAE—Sepharose离子交换和β-aminobenzyl-1-thio-t3-D-galactopyranoside(PABTG)亲和层析方法进行酶的分离纯化,纯化倍数达到31.4;经SDS-PAGE检测分子量为30kD。酶学性质的研究表明:该酶最适pH值为6.6,最适反应温度为37℃,pH在5.5~8.
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