【摘 要】
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目的:建立高质量的连钱草基因组DNA的提取方法。方法:在传统十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法的基础上加以改良,比较不同浓度CTAB对提取的连钱草基因组DNA质量的影响,并对所得的
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目的:建立高质量的连钱草基因组DNA的提取方法。方法:在传统十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法的基础上加以改良,比较不同浓度CTAB对提取的连钱草基因组DNA质量的影响,并对所得的DNA采用紫外分光光度计、电泳和PCR扩增等方法进行检测。结果:用2%浓度的CTAB处理所获得的基因组DNA质量较好,蛋白质残留少,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行PCR扩增得到的条带清晰,多态性好。结论:改良CTAB法提取的连钱草基因组DNA适合进行以PCR为基础的分子生物学研究。
Objective: To establish a high quality genomic DNA extraction method. Methods: Based on the traditional cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) method, the effects of different concentrations of CTAB on the quality of extracted genomic DNA were compared. The obtained DNA was analyzed by UV spectrophotometer , Electrophoresis and PCR amplification methods for testing. Results: The genomic DNA obtained by 2% CTAB treatment had better quality, less protein residues, complete digestion of RNA and no significant degradation of DNA. The PCR amplification showed a clear band with good polymorphism. Conclusion: The genomic DNA extracted from improved Torreya sinensis by modified CTAB method is suitable for PCR-based molecular biology research.
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