【摘 要】
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设计特异引物,以猪圆环病毒2型(PCV-2)杭州株HZ0201的基因组DNA为模板,PCR扩增出ORF3基因,构建了pGEX-4T-1-ORF3原核表达载体和pEGFP-C2-ORF3真核表达载体.ORF3基因全长315 b
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设计特异引物,以猪圆环病毒2型(PCV-2)杭州株HZ0201的基因组DNA为模板,PCR扩增出ORF3基因,构建了pGEX-4T-1-ORF3原核表达载体和pEGFP-C2-ORF3真核表达载体.ORF3基因全长315 bp,编码105个氨基酸.SDS-PAGE、Western blot分析及真核PK15细胞转染结果显示:ORF3蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式存在,分子量大小约为37.7 ku;ORF3重组蛋白在真核PK15细胞的细胞核和细胞浆都有表达,尤其在细胞核中表达量较高,且对细胞有一定的毒性.
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《孙子·谋攻篇》：“知己知彼，百战不殆；不知彼而知己，一胜一负；不知彼，不知己，每战必殆。”意思是如果对敌我双方的情况都能了解透彻，打起仗来百战都不会失败。既不了解敌人，又不了解自己，每战都有危险。如果我们把中考看成一场总战役，那么化学学科的考试就是一场分战役，要取得战争的胜利，我们必须每战必争！教师是这场战争的总指挥，必须充分掌握化学学科的特点，学生的性格特点，才能知己知彼！ 一、充分认识学生