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【摘要】目的：探讨子痫前期、子痫患者胎盘组织HIF～1的表达，研究治疗妊高症的病因及预防措施，为诊疗开辟新的思路和途径。方法 采用亲和免疫细胞化学技术SABC法检测30例正常足月妊娠孕妇及90例妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中HIF～1蛋白的表达。 结果 子痫前期、子痫患者胎盘组织中HIF～1蛋白的表达则高于对照组。 结论 HIF～1 参与了胎盘组织血管病变机理过程，其表达异常可能与妊娠期高血压疾病的病因及病理过程有关。
【关键词】 子痫 ； 胎盘 ；血管；缺氧
妊娠期高血压症简称妊高症，是妇产科临床特有的一种疾病，临床发病率较高，有文献指出[1]国内发病率约10%左右，严重地影响了产妇及婴儿的健康和生命安全，是目前临床上的重要研究课题之一。从目前的文献来看，妊高症主要是由于滋养细胞侵入子宫内膜导致胎盘组织发生缺氧、缺血现象，最终出现高血压、水肿及蛋白尿等临床症状。笔者通过对正常产妇和子痫前期、子痫患者的HIF～1蛋白表达进行观察和比较，以期了解妊高症患者胎盘血液供应发生变化的相关机制，为临床提供可靠研究依据，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 临床资料 摘取深圳南山区人民医院自2009年12月至2012年1月之间进行剖宫产分娩的产妇资料120例作为研究对象，其中90例妊高症患者作为观察组，年龄在24～41岁之间，平均年龄30.9±4.5岁，孕周36～41周，平均38.1±2.1周；其余30例正常产妇作为对照组，年龄在23～40岁之间，平均年龄31.2±5.1岁，孕周37～42周，平均孕周38.4±1.2周。两组产妇在年龄、孕周等一般资料对比上无明显差异，不具有统计学意义（P>0.05）。入院患者均排除其他妊娠合并症及相关并发症，术前未进入产程，经剖宫产结束分娩。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 在娩出胎盘之后立刻进行切除，取1cm×1cm×1cm大小胎盘组织用生理盐水进行冲洗后放入4%中性甲醛中进行固定，最后用石蜡包埋。
1.2.2 实验方法 试验方法采用亲和免疫细胞技术及SABC法（链霉素-生物素-过氧化物酶复合物技术）进行胎盘组织中HIF～1蛋白的表达。
1.2.3 结果判定 以HIF～1在镜下出现的棕黄色细颗粒为观察指标，观察细胞核及胞浆内出现的颗粒数，高倍镜下对每张切片进行视野的随机选取，共取5个视野，每个视野内选取200个细胞，参照Birner法进行阳性细胞比例和染色强度的半定量判定。
1.2.4 统计学方法 将所有数据录入统计学处理软件SPSS 13.0进行相关处理，以方差值P<0.05作为判定显著性标准，整体数据以x±s进行表达。
2 结果
HIF～1α在两组胎盘组织中的表达强度的比较：正常妊娠组HIF～1α的阳性表达率47%，轻度子痫前期组阳性率90%，重度子痫前期阳性率97%，子痫组阳性率93%。轻度子痫前期组与正常组HIF-1α的阳性表达率比较差异有显著性（P=0.014，P<0.05）；重度子痫前期组与轻度子痫前期组HIF-1α的阳性表达率比较差异有显著性（P=0.036，P<0.05）；子痫组与重度子痫前期组HIF-1α的阳性表达率比较差异无显著性（P=0.348，P>0.05）。
3 讨论
缺氧诱导因子～1（HIF～1）作为异二聚体转录因子的一种在人体内广泛被表达，它的功能亚基HIF～1α在正常的氧浓度下是不会被检测到的，而地氧浓度则会导致HIF～1α的表达增加，从而使其能被检测到。从目前的研究成果来看[2]，产妇的发生子痫的早期可能存在滋养细胞功能和分化出现异常，其浸润功能在表达过程中收到严格的控制，例如胎盘局部氧含量的变化即会影响到滋养细胞浸润功能的改变，这也就说明激素、蛋白以及细胞因子等因素都会造成着床发生和胎盘形成的改变。HIF～1α作为参与调节的因素之一，是贯穿在整个妊娠过程中的，HIF～1α的表达异常很可能会造成着床的改变，使滋养细胞在妊娠早期发生浸润功能的异常改变，导致胎盘植入过浅和血管发育障碍等情况的发生。多数学者认为[3]，HIF～1α作为调控滋养细胞浸润功能和分化功能的重要因素，它的表达关系到妊高症的发生。从本文研究结果来看，观察组产妇的HIF～1α蛋白表达水平要明显高于正常产妇，而且随着HIF～1α上升患者的病情也会加重，因此我们可以认为HIF～1α与子痫前期、子痫的发生有着密切的关联，随着HIF～1α的上升，滋养细胞浸润功能下降导致胎盘过浅而致发病。Caniggia等人[4]指出，原位杂交和免疫组化检验与正常孕妇的胎盘组织相比，妊高症患者的胎盘组织内缺氧诱导因子及蛋白水平都有明显增加，这说明缺氧诱导因子及蛋白水平的异常增高是导致妊高症发生的重要因素。子痫前期及子痫患者胎盘组织中HIF～1α的异常表达可能是胎盘着床过浅的一个重要指标，但是HIF～1α在相关的血管病变机制中的活性和作用尚待继续研究。
参考文献
[1]乐杰主编.妇产科学[M]. 第 7 版.人民卫生出版社：2005：97-98.
[2]Birner P， Schindl M， Obermair A， et al. Overexpression of hypoxia inducible factor 1αis a marker for an unfavorable prognosis in early stage invasive cervical cancer [J]. Cancer Res， 2000， 60 （17）：4693～4696.
[3]黄莉华，庞战军，邢福祺.早孕和足月滋养细胞中侵袭相关性基因的表达变化[J].细胞与分子生物学杂志，2003，19（3）：302-304.
[4]Caniggia I ，Winter JL. Adriana and luisa castellucci award lecture 2001. Hypoxia inducible factor-1 ： oxygen regulation of trophoblast differentiation in normal and preeclamptic pregnancies a review[J]. Placenta .2002 .23[ Suppl A] ：S47-57.
【关键词】 子痫 ； 胎盘 ；血管；缺氧
妊娠期高血压症简称妊高症，是妇产科临床特有的一种疾病，临床发病率较高，有文献指出[1]国内发病率约10%左右，严重地影响了产妇及婴儿的健康和生命安全，是目前临床上的重要研究课题之一。从目前的文献来看，妊高症主要是由于滋养细胞侵入子宫内膜导致胎盘组织发生缺氧、缺血现象，最终出现高血压、水肿及蛋白尿等临床症状。笔者通过对正常产妇和子痫前期、子痫患者的HIF～1蛋白表达进行观察和比较，以期了解妊高症患者胎盘血液供应发生变化的相关机制，为临床提供可靠研究依据，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 临床资料 摘取深圳南山区人民医院自2009年12月至2012年1月之间进行剖宫产分娩的产妇资料120例作为研究对象，其中90例妊高症患者作为观察组，年龄在24～41岁之间，平均年龄30.9±4.5岁，孕周36～41周，平均38.1±2.1周；其余30例正常产妇作为对照组，年龄在23～40岁之间，平均年龄31.2±5.1岁，孕周37～42周，平均孕周38.4±1.2周。两组产妇在年龄、孕周等一般资料对比上无明显差异，不具有统计学意义（P>0.05）。入院患者均排除其他妊娠合并症及相关并发症，术前未进入产程，经剖宫产结束分娩。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 在娩出胎盘之后立刻进行切除，取1cm×1cm×1cm大小胎盘组织用生理盐水进行冲洗后放入4%中性甲醛中进行固定，最后用石蜡包埋。
1.2.2 实验方法 试验方法采用亲和免疫细胞技术及SABC法（链霉素-生物素-过氧化物酶复合物技术）进行胎盘组织中HIF～1蛋白的表达。
1.2.3 结果判定 以HIF～1在镜下出现的棕黄色细颗粒为观察指标，观察细胞核及胞浆内出现的颗粒数，高倍镜下对每张切片进行视野的随机选取，共取5个视野，每个视野内选取200个细胞，参照Birner法进行阳性细胞比例和染色强度的半定量判定。
1.2.4 统计学方法 将所有数据录入统计学处理软件SPSS 13.0进行相关处理，以方差值P<0.05作为判定显著性标准，整体数据以x±s进行表达。
2 结果
HIF～1α在两组胎盘组织中的表达强度的比较：正常妊娠组HIF～1α的阳性表达率47%，轻度子痫前期组阳性率90%，重度子痫前期阳性率97%，子痫组阳性率93%。轻度子痫前期组与正常组HIF-1α的阳性表达率比较差异有显著性（P=0.014，P<0.05）；重度子痫前期组与轻度子痫前期组HIF-1α的阳性表达率比较差异有显著性（P=0.036，P<0.05）；子痫组与重度子痫前期组HIF-1α的阳性表达率比较差异无显著性（P=0.348，P>0.05）。
3 讨论
缺氧诱导因子～1（HIF～1）作为异二聚体转录因子的一种在人体内广泛被表达，它的功能亚基HIF～1α在正常的氧浓度下是不会被检测到的，而地氧浓度则会导致HIF～1α的表达增加，从而使其能被检测到。从目前的研究成果来看[2]，产妇的发生子痫的早期可能存在滋养细胞功能和分化出现异常，其浸润功能在表达过程中收到严格的控制，例如胎盘局部氧含量的变化即会影响到滋养细胞浸润功能的改变，这也就说明激素、蛋白以及细胞因子等因素都会造成着床发生和胎盘形成的改变。HIF～1α作为参与调节的因素之一，是贯穿在整个妊娠过程中的，HIF～1α的表达异常很可能会造成着床的改变，使滋养细胞在妊娠早期发生浸润功能的异常改变，导致胎盘植入过浅和血管发育障碍等情况的发生。多数学者认为[3]，HIF～1α作为调控滋养细胞浸润功能和分化功能的重要因素，它的表达关系到妊高症的发生。从本文研究结果来看，观察组产妇的HIF～1α蛋白表达水平要明显高于正常产妇，而且随着HIF～1α上升患者的病情也会加重，因此我们可以认为HIF～1α与子痫前期、子痫的发生有着密切的关联，随着HIF～1α的上升，滋养细胞浸润功能下降导致胎盘过浅而致发病。Caniggia等人[4]指出，原位杂交和免疫组化检验与正常孕妇的胎盘组织相比，妊高症患者的胎盘组织内缺氧诱导因子及蛋白水平都有明显增加，这说明缺氧诱导因子及蛋白水平的异常增高是导致妊高症发生的重要因素。子痫前期及子痫患者胎盘组织中HIF～1α的异常表达可能是胎盘着床过浅的一个重要指标，但是HIF～1α在相关的血管病变机制中的活性和作用尚待继续研究。
参考文献
[1]乐杰主编.妇产科学[M]. 第 7 版.人民卫生出版社：2005：97-98.
[2]Birner P， Schindl M， Obermair A， et al. Overexpression of hypoxia inducible factor 1αis a marker for an unfavorable prognosis in early stage invasive cervical cancer [J]. Cancer Res， 2000， 60 （17）：4693～4696.
[3]黄莉华，庞战军，邢福祺.早孕和足月滋养细胞中侵袭相关性基因的表达变化[J].细胞与分子生物学杂志，2003，19（3）：302-304.
[4]Caniggia I ，Winter JL. Adriana and luisa castellucci award lecture 2001. Hypoxia inducible factor-1 ： oxygen regulation of trophoblast differentiation in normal and preeclamptic pregnancies a review[J]. Placenta .2002 .23[ Suppl A] ：S47-57.