【摘 要】
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大肠埃希菌O157∶H7（Escherichia coli O157∶H7,E. coli O157∶H7）作为一种食源性致病菌，其分布广泛、危害性大。为了研制一种基于E. coli O157∶H7的既能实现快速、简单和灵敏检测，又能够实现常温储存及运输的试剂盒，本研究利用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time fluorescence quantitative polymerase ch
【机 构】
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中国农业大学营养与健康系食品精准营养与质量控制教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（31871875）； 山东省重点研发计划（2019JZZY011014）；
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大肠埃希菌O157∶H7（Escherichia coli O157∶H7,E. coli O157∶H7）作为一种食源性致病菌，其分布广泛、危害性大。为了研制一种基于E. coli O157∶H7的既能实现快速、简单和灵敏检测，又能够实现常温储存及运输的试剂盒，本研究利用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR）技术，结合真空冷冻干燥技术，研制了保留核酸检测性能、易于常温储存及运输、减少气溶胶污染的E. coli O157∶H7荧光定量冻干检测试剂盒。研制的试剂盒采用冻干技术保留了核酸扩增试剂的检测性能，复水后，在Taq DNA聚合酶的作用下通过循环扩增实时监测荧光信号的积累，实现荧光定量检测，所提出的方法在40 min内可检测到2.1 copies/μL的eaeA基因。该技术为E. coli O157∶H7的检测提供良好的研究基础和技术参考，填补了市场灵敏度高、便于储存的E. coli O157∶H7检测试剂盒的缺乏。
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