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目的：获得适合的益智ISSR-PCR扩增反应体系。方法：利用正交设计L46（4^5）和单因素试验对益智ISSR-PCR反应体系的5因素（Taq酶，Mg^2＋，模板DNA．dNTPs，引物）在4个水平上进行优化试验，将二者所得结果进行综合比较分析。结果：最终扶得益智ISSR-PCR反应的最优体系（20μl）为：模板DNA 100ng，Mg^2＋ 3．0mmol／L，引物0．8μmol／L，dNTPs0．25mmol／L，Taq DNA聚合酶1．0U。最后，对益智ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火，得到