【摘 要】
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目的:研究慢性地塞米松对海马神经元损伤及NLRP-1炎症小体激活的机制。方法:乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒和Hoechst 33258染色检测测定海马神经元损伤的情况
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(No.81371329,81671384)
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目的:研究慢性地塞米松对海马神经元损伤及NLRP-1炎症小体激活的机制。方法:乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒和Hoechst 33258染色检测测定海马神经元损伤的情况。Western blot检测微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)、炎症相关蛋白(NLRP-1、ASC、Caspase-1)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BK)表达的变化。ELISA试剂盒检测细胞炎性因子IL-1β、IL-18的含量变化。Q-PCR检测NLRP-1、IL-1β、BK的m RNA表达变化。全细胞膜片钳技术记录BK通道电流变化情况。离子选择电极法检测海马神经元细胞内钾离子的浓度。结果:慢性地塞米松(5 mg·kg-1,3 d)治疗能明显促进海马神经元LDH的释放,促进神经凋亡和减少MAP2的表达;能明显增加海马神经元NLRP-1、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白的表达;明显增加海马神经元NLRP-1、IL-1β、BK通道m RNA的表达;地塞米松处理能明显增加BK通道的电流,随着K+外流导致细胞内[K+]i浓度降低,进而激活了NLRP-1炎症小体,BK通道抑制剂Ib Tx对地塞米松的上述作用具有一定的抑制作用。结论:慢性地塞米松暴露可通过BK-NLRP1信号通路激活NLRP1炎症小体导致神经炎症,促进海马神经元损伤。
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