蓖麻Lm型雌性系ISSR-PCR反应体系建立与优化

来源 :内蒙古民族大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jia343212539
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本文采用单因子试验法,以蓖麻Lm型雌性株为材料,对蓖麻Lm型雌性系的ISSR-PCR体系进行了优化.结果表明:最优体系中Mg2+用量为2.0μl;d NTP用量为2.0μl;引物用量为2.0μl;1.2mg/ml EB染色剂用量大于等于5μl时染色的效果较好.PCR扩增反应条件:94℃预变性4min,94℃变性30s,55℃退火45s,72℃延伸2min,45个循环,72℃最后延伸10min,4℃保存.在本试验建立的ISSR优化体系下,可以提供清晰度高、重演性好、稳定性强的分子标记体系.
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