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目的以长链PCR（Long-PCR）技术为基础，应用融合PCR方法扩增乙型脑炎病毒（JEV）全长基因组。方法根据GenBank中收录的JEV全长基因组序列设计引物，分别扩增JEVSA14-14-2株的5′和3′半长分子，在5′端上游引物中引入17启动子核心序列。利用细胞培养增殖病毒，提取病毒RNA，逆转录后采用LongPCR方法得到JEV的5′和3′两个半长分子，在此基础上进行融合PCR，得到JEV全长cDNA分子，克隆入pGEMT-easy载体，酶切鉴定并测序。结果扩增出均6000bp的JEV的5′和3