【摘 要】
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[目的]本文旨在解决传统慢病毒生产方法中存在的实际操作复杂或成本高等问题,提高慢病毒生产效率。[方法]使用了以聚乙烯亚胺(PEI)为转染介质,以聚乙二醇6000(PEG6000)为离心
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[目的]本文旨在解决传统慢病毒生产方法中存在的实际操作复杂或成本高等问题,提高慢病毒生产效率。[方法]使用了以聚乙烯亚胺(PEI)为转染介质,以聚乙二醇6000(PEG6000)为离心浓缩介质的慢病毒生产方法,并对浓缩后的慢病毒进行滴度测定。还对可能影响慢病毒滴度的几个关键因素——转染初始细胞数、N/P值、转染质粒DNA量、佐剂的选择等的作用进行了分析。[结果]在使用15 cm培养皿生产慢病毒的条件下,转染质粒DNA总量10.5μg,N/P=20,PEI浓储液p H值为7.0~9.0,转染时293T细胞数(0.5~2)×107时,可以获得较好的慢病毒滴度。[结论]PEI作为一种新的转染试剂,可以替代磷酸钙和脂质体用于高滴度慢病毒的生产。
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