【摘 要】
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目的：探究结核分枝杆菌RD区ESPJ和ESPK蛋白在巨噬细胞极化中的作用。方法：将结核分枝杆菌RD区Rv3878和Rv3879c基因分别构建至原核表达载体，体外诱导表达并纯化重组蛋白GST-ESPJ和HIS-ESPK，用重组蛋白刺激巨噬细胞，Western Blot和ELISA法检测重组蛋白对巨噬细胞极化的影响；构建重组菌BCGRv3878和BCG-Rv3879c，用重组菌感染巨噬细胞，RT-qP
【机 构】
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武汉大学泰康医学院(基础医学院)免疫学系
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（编号：81000714）；
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目的：探究结核分枝杆菌RD区ESPJ和ESPK蛋白在巨噬细胞极化中的作用。方法：将结核分枝杆菌RD区Rv3878和Rv3879c基因分别构建至原核表达载体，体外诱导表达并纯化重组蛋白GST-ESPJ和HIS-ESPK，用重组蛋白刺激巨噬细胞，Western Blot和ELISA法检测重组蛋白对巨噬细胞极化的影响；构建重组菌BCGRv3878和BCG-Rv3879c，用重组菌感染巨噬细胞，RT-qPCR、Western Blot和ELISA法检测重组BCG对巨噬细胞极化的影响，并采用菌落计数法检测重组BCG在巨噬细胞内的存活。结果：重组ESPJ和ESPK蛋白刺激巨噬细胞均可诱导其向M2型极化，转录因子c-Maf表达增加；成功构建重组菌BCG-Rv3878和BCG-Rv3879c，重组BCG感染巨噬细胞也能诱导M2型巨噬细胞极化，巨噬细胞内c-Maf转录因子表达明显升高；菌落计数结果显示重组BCG胞内存活增加。结论：结核分枝杆菌ESPJ和ESPK蛋白可诱导M2型巨噬细胞极化并促进细菌的胞内存活，这可能与结核分枝杆菌的免疫逃逸和潜伏感染有关，转录因子c-Maf在其中可能起到至关重要的作用。
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