论文部分内容阅读
摘要综述了有关饥饿对甲壳动物生化组成的影响，并从脂类、蛋白质、碳水化合物以及核酸等方面进行总结与分析。
关键词甲壳动物；生化组成；饥饿
中图分类号S185文献标识码A文章编号0517-6611（2014）14-04376-04
Effects of Starvation on Biochemical Composition of Crustacean
LIU Yu（Xiamen Environmental Protection Research Institute， Xiamen， Fujian 361006）
AbstractThis paper describes the effects of starvation on biochemical composition of crustacean， analyzes the effects on lipids， proteins， carbohydrates and nucleic acids during starvation.
Key wordsCrustacean； Biochemical composition； Starvation
由于环境变迁、季节更替以及食物分布在时空上的不均匀性，使自然界中的甲壳动物经常在其生命周期中面临食物资源短缺而受到饥饿胁迫。即使在饲养条件下，它们也会经受饥饿。因此，研究饥饿对甲壳动物机体生化组成的影响，不仅有助于揭示甲壳动物对饥饿胁迫的适应对策，而且对其资源管理及实践生产也有重要指导意义。甲壳动物是水生动物中的一个主要类群，其中一些种类已在世界广泛养殖，具有重要的经济价值。笔者综述了有关饥饿对甲壳动物机体中脂类、蛋白质、碳水化合物以及核酸等影响的研究进展，以期为深入研究其对饥饿适应的生理机制提供参考。
1饥饿对甲壳动物脂代谢的影响
脂类是甲壳动物生长发育所需能量的主要来源之一，也是其生物膜结构的重要成分，特别是其中的磷脂、三酰甘油、胆固醇和脂肪酸，对甲壳动物的成活和生长有重要影响，并与其蜕皮、生殖等生命活动密切相关。由于有些在甲壳动物体内不能合成或合成量过少，不能满足其生长发育的需要，因此需要通过外界饵料进行添加补充[1]。Moore等[2]在对虾不同生长时期进行不同程度投喂，发现其体脂含量对其饱食程度十分敏感，并随着饱食程度的降低而减少。
甲壳动物的体脂组成因种类而异，且受季节变化的影响。Vinagre和Da Silva[3]研究表明颗粒张口蟹（Chasmognathus granulate）似乎在春季与夏季以肝胰脏和肌肉的糖原为最主要代谢能源，而在秋季与冬季则以肌肉中的脂肪作为代谢能源。国内外学者已从脂类的生理意义和需求以及营养代谢等方面对甲壳动物脂类营养进行了研究。
磷脂是甲壳动物的主要脂类成分，如对虾体内磷脂含量占含脂量的47%[4]。磷脂也是细胞膜的主要成分。已有大量研究表明，甲壳动物在孵化后迅速生长、发育的这段时期需要丰富的磷脂来形成和更新细胞，尤其是甲壳动物幼体对磷脂的缺乏非常敏感。由于幼体自身生物合成的磷脂远远不能满足其需要，所以饵料中的磷脂作为外源性磷脂可以改善幼体内源性磷脂不足的情况，满足幼体对磷脂的需求。用缺乏磷脂的饲料投喂日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）的蚤状幼体，发现其在发育到糠虾幼体期前死亡率已达到100%[1]。由此可见，磷脂是甲壳动物尤其幼体阶段需要从外界大量摄取的一种必需营养物质。
磷脂包括磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰肌醇（PI）等种类。Kanazawa等推测磷脂的生理作用主要體现在以下方面：①为重新合成磷脂能力有限的虾蟹提供磷脂；②磷脂参与饵料脂类（如甘油三酯、胆固醇）的乳化，以利于它们的消化吸收；③磷脂是脂蛋白的必需组成成分，血淋巴中的脂蛋白对脂类在体内运输起重要作用[1]。由此可见，磷脂对甲壳动物的生长发育相当重要。磷脂的极性强，容易被乳化，也更容易与胆盐作用而被吸收，因此对于消化能力尚不完善的甲壳动物幼体，磷脂作为能量和必需脂肪酸（EFA）的来源比中性脂更好[5]。在饲料中添加1%的蛤粉磷脂，可以改善日本囊对虾幼体生长，但添加相同比例且相同来源的磷脂中获得的脂肪酸却没有类似的作用[6]。国内也有研究表明饲料中添加磷脂能显著提高中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）大眼幼体育成仔蟹的成活率，并能加速仔蟹的蜕皮，而添加多不饱和脂肪酸（PUFA）虽然可以提高大眼幼体到Ⅰ期仔蟹的成活率，但对提高大眼幼体到Ⅲ期仔蟹成活率的作用不显著[7]。磷脂改善生长、存活的作用在许多不同种类中都已经得到证实，如日本囊对虾、美洲螯龙虾（Homarus americanus）、中国明对虾（Fenneropenaeus chinensis）、斑节对虾（Penaeus monodon）、长毛明对虾（Penaeus penicillatus）、凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）、墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguieusis）、中华绒螯蟹等，饵料中磷脂都能不同程度提高其幼体的生长率和存活率 [6-8]。
有关甲壳动物饥饿期间脂类物质代谢的研究表明，饥饿阶段甲壳动物主要消耗中性脂，极性脂因参与细胞生物膜的构建而不被利用[9-10]；中性脂中三酰甘油（Triacylglycerol，TAG）作为主要贮能物质被利用。对凡纳滨对虾在饥饿期间体组成的研究表明，三酰甘油在饥饿的第1天就迅速被消耗[11]，表明三酰甘油能在短期饥饿时提供能量，而固醇（Sterol）作为生物膜的结构成分不被利用。因此，Stuck等建议使用三酰甘油/固醇比值来评价甲壳动物营养状况[11]。
胆固醇是性激素、蜕皮激素、肾上腺皮质激素、胆汁酸和维生素D的前体，具有重要的生理功能。通常情况下，甲壳动物缺乏将乙酸合成胆固醇的能力[12-13]，因而需要从外界摄取。这可从许多种类的相关研究得到证实，如无齿相手蟹（Seama dehaani）和三齿厚蟹（Helice tridens）、黄道蟹（Cancer pagurus）、欧洲螯龙虾（Homarus gammarus）[14]、日本囊对虾、日本龙虾（Panulirus japonicus）和三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）[12]等。虾蟹类的外源胆固醇则以游离固醇或酯化固醇的形式存在于体内[15-16]。Guary和Kanazawa[15]分别对处于蜕皮后期、蜕皮间期、蜕皮前期的日本囊对虾注射14C胆固醇，3 d后分析其血淋巴、眼及眼柄、外骨骼、真皮、中肠腺、肠道、性腺及肌肉的放射性强度，结果发现放射性物质主要集中在真皮组织和性腺，说明胆固醇与虾蟹类的蜕皮和生殖有关。胆固醇转化为蜕皮激素已在近方蟹（Hemigrapsus nudus）和美洲螯龙虾中通过同位素试验得到证实，且其合成代谢途径可能与昆虫蜕皮激素的生物合成和代谢途径相同[15]。 李淡秋[17]分别测定了中国明对虾、日本沼虾（Macrobrachium nipponense）、安氏白虾（Exopalaemon annandalei）、克氏原螯虾（Procambarus clarkii）、葛氏长臂虾（Palaemon gravieri）、中华绒螯蟹和三疣梭子蟹等7种甲壳动物的脂肪酸组成。这些种类脂肪酸组成的共同特征是：不饱和脂肪酸含量显著高于饱和脂肪酸，多稀酸在不饱和脂肪酸中含量甚高，约占不饱和脂肪酸总量的60%。上述7种甲壳动物隶属不同的科，脂肪酸组成的区别在于其含量不同。但同属对虾科的中国明对虾、日本囊对虾和斑节对虾，它们的脂肪酸组成也不同，大部分脂肪酸最大和最小含量之差都超过5.0%，其中20：4n6的差异最大，为12.8%[18]。日本囊对虾、中国明对虾及罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergi）可以在体内由脂肪酸合成磷脂，但这种体内合成的量远远不能满足其生长发育的需要，因此还需要由外源饵料进行补充。
锯缘青蟹（Scylla serrata）饥饿幼体同时动用蛋白质和脂类作为能量来源，且以脂类为主。当幼体饥饿时间超过1.5 d，脂类储存就已接近匮乏；饥饿的幼体明显地保留高度不饱和脂肪酸20：4n6和20：5n3（EPA），而22：6n3（DHA）的保留程度很低，饱和脂肪酸16：0、单不饱和脂肪酸16：1和18：1是主要的供能脂肪酸。由此可见，22：6n3（DHA）对早期幼体的生长发育是极为重要的[19]。
Vinagre和Da Silva[3]在对颗粒张口蟹进行饥饿处理前分别投喂高蛋白和高碳水化合物的食物，再对投喂2种不同饵料的蟹进行饥饿处理后的体组成分析表明脂肪均是饥饿期间的代谢能源。
Kanazawa等[20]在斑节对虾与墨吉明对虾中利用放射性同位素标记方法发现，18：2n6、18：3n3、20：5n3和22：6n3均未标记上放射性同位素，说明它们均为必需脂肪酸，应从体外获得[20]。
Arthur等[21]在红岩龙虾饥饿期间消耗大量的脂肪，而且主要以磷脂分解为主，固醇得以保留。脂肪酸含量也在第一次蜕皮到第Ⅳ期有了明显改变，说明了它们的必要性。通过对必需脂肪酸的了解，更加体现了对十八碳多不饱和脂肪酸的需求。
2饥饿对甲壳动物蛋白质代谢的影响
甲壳动物主要由蛋白质组成。以对虾为例，蛋白质是对虾天然饵料的主要组成成分。据此推测，对虾对蛋白质的需求量很高[22-26]。在对虾类中，对虾属（包括新对虾属）都可以认为是食肉动物。与其他食肉动物一样，这意味着对虾饵料中的蛋白质超过需求，过剩的蛋白质被氧化，产生能量[27]。这说明蛋白质对对虾类的能量供应是至关重要的。Arthur等[21]对红岩龙虾进行饥饿试验也证明了饥饿期间消耗了大量的蛋白质。
Barclay等[28]将这个概念应用于食用对虾（Penaeus esculentus）的试验，对虾在饥饿7 d后已代谢掉3倍于脂量的蛋白质，从而证实了蛋白质作为能量贮备的重要性。Dall和Smith[29]在一个类似的试验中发现，食用对虾饥饿5 d后氧/氮比已降至將近7∶1，表明氨基酸此时已成为唯一的能源。即使是饱食的对虾，氧/氮比也为13.6～16.4∶1，说明在正常时氨基酸也在氧化代谢中起主要作用。
由于饵料中大量的氨基酸被氧化，所以只要必需氨基酸需要量得到满足，蛋白质的质量和来源均显得无关紧要。对人工饵料蛋白质成分的营养研究表明饵料蛋白质的氨基酸组成应该与对虾组织相符合[30]。
许多海洋甲壳动物游离氨基酸（FAA）占氨基酸总量高达20%[31]。在分析蛋白质前的初步净化过程中，FAA中的氨基酸比例不同于蛋白质中氨基酸的比例；甘氨酸含量最大，与精氨酸、脯氨酸共占FAA总量的大约90%[32-33]。Torres发现饥饿使FAA发生变化[3-4]。Barclay等[28]研究表明，饥饿过程中腹部肌肉是参与代谢的主要组织，但Dall和Smith[33]发现肌肉总的氨基酸含量仅发生很少的变化，而许多FAA则发生显著变化。例如，饥饿15 d的甘氨酸含量增加，但脯氨酸含量几乎降至零。在饥饿过程中，水解肌肉蛋白质以产生能量，但其余蛋白质的氨基酸组成保持不变。从肌肉蛋白质水解得到的氨基酸成为FAA，进而可供氧化。FAA可能是正常饵料氨基酸氧化的途径，并且脯氨酸可能提供直接能源，这与其他无脊椎动物一样。
用结晶氨基酸替代蛋白质作为饲料，不能使对虾以合理的速度生长[34-35]，但在蛋白质中加入某些氨基酸后却能促进生长。例如，仅投喂酪蛋白，对虾生长不佳，但当加入精氨酸后对虾幼体的生长可与鲜活饵料产生的效果相比[36]。精氨酸在甲壳动物中起到一种腺苷酸的功能，因为甲壳动物不能自身合成，因此对其需求量较大。精氨酸在鸟氨酸循环中也与脯氨酸结合。海洋无脊椎动物的蛋白质大都含有较高含量的脯氨酸和精氨酸，当这些动物作为对虾饵料时，对虾生长迅速。由此可见，对虾饵料中蛋白质和氨基酸的氧化代谢还很不清楚，但可以确定需要量很大。
3饥饿对甲壳动物碳水化合物的影响
饥饿期间的主要能源供应不仅因种类而异，而且与该甲壳动物的营养史有关。在给颗粒张口蟹投喂高蛋白饵料后进行饥饿处理，发现血淋巴中的糖原和肝胰脏中的糖原并没有受到饥饿的影响。然而，肌肉糖原却在饥饿期间有所下降，而在投喂高碳水化合物饵料后肌肉和肝胰脏中的糖原则成为饥饿期间的主要能源基础[3]。褐虾（Lirceus brachyurus）和日本囊对虾在饥饿4周期间首先以碳水化合物为主要代谢能源[37-38]。褐虾（Lireus brachyurus）和河螯虾（Astacus astacus）在饥饿期间主要依靠碳水化合物提供能量[38-39]。在对海蟑螂饥饿1周后，发现游离糖原逐渐被消耗掉，而血液中的蛋白质结合糖原成分并没有改变，这表明只有游离糖原参与了营养生理作用[40]。 4饥饿对甲壳动物核酸的影响
RNA在蛋白质合成过程中起到重要作用，其含量反映了细胞内蛋白质合成速率，表现为机体体重的变化，而细胞内的DNA含量比较稳定。因此，RNA/DNA比值可以反映单位细胞的蛋白质合成速率。目前，该生理学指标被广泛用于评价水生动物的生长和营养状况[41-42]。大量研究表明，甲壳动物饥饿期间体内的RNA/DNA比值显著下降。但也有不少学者认为甲壳动物的蜕皮对RNA/DNA比值有很大影响[11，42]。Stuck等[11]提出通过限定某个蜕皮生理阶段或加大试验的样本数量来增加RNA/DNA比值在评价该类动物营养状态时的有效性。
试验表明，RNA和DNA的浓度以及RNA/DNA比值在凡纳滨对虾生长的5个阶段没有明显的变化。此外，RNA浓度和RNA/DNA比值被成功应用于区别未投喂、适量投喂和饱食投喂的凡纳滨对虾[43]。
对三疣梭子蟹的研究发现，在饥饿3 d内RNA浓度下降了31%，并在此后的30 d内持续下降最终达到正常投喂组的27%。DNA浓度在饥饿3～6 d下降21%，并在接下来的饥饿期间保持稳定。三疣梭子蟹在经过长期饥饿后表现了很高的恢复能力。DNA浓度在饥饿15和30 d并恢复投喂5 d后分别分别增长了35%和22%，而RNA浓度分别增长了129%和91%。RNA浓度和RNA/DNA比值是一个敏感的营养参数，尤其是在早期饥饿阶段[42]。
对美洲螯龙虾幼体而言，RNA/DNA比值对短期饥饿是一个很敏感的参数。然而这个比例对处于蜕皮C和DI期的蟹的投喂水平相符，而与温度规律相反[44]。
5饥饿对甲壳动物维生素组分的影响
6小结
在饥饿条件下，甲壳动物对机体贮能物质的动用是因种类而异，不同种类在饥饿阶段的主要能源物质有很大差异。对于一些淡水种类（如褐虾和河蟹虾），它们在饥饿期间主要依靠碳水化合物提供能量。绝大多数海水种类机体内碳水化合物含量很少，长期饥饿状态下它们主要由脂肪和蛋白质提供能量。对能源物质的动用是有先后顺序的，饥饿期间甲壳动物还可以交替利用机体能源物质。即使是同一种类，由于饥饿前营养史不同，它们在饥饿期间利用贮能物质的情况也有一定差异。
总而言之，目前饥饿对甲壳动物机体生化组成的影响并没有形成具体的规律，一些生理调节机制仍需要进一步研究。
安徽农业科学2014年参考文献
[1] KANAZAWA A，TESHIMA S，SAKAMOTO M.Effect of dietary lipids，fatty acids，and phospholipids on growth and survival of prawn（Penaeus japonicus）larvae[J].Aquaculture，1985，50：39-49.
[2] MOORE L E，SMITH D M，LONERAGAN N R.Blood refractive index and wholebody lipidcontent as indicators of nutritional condition for penaeid prawns（Decapoda：Penaeidae）[J].J Exp Mar Biol Ecol，2000，244：131-143.
[3] VINAGRE A S，DA SILVA R S M.Effects of starvation on the carbohydrate and lipid metabolism in crabs previously maintained on a high protein or carbohydraterich diet[J].Comp Biochem Physiol，1992，102（3）：579-583.
[4] CLARKE A，WICKINS J F.Lipid content and composition of cultured Penaeus merguiensis fed with animal food[J].Aquaculture，1980，20：17-27.
[5] KOVEN W M，KOLKOVSKI S，TANDLER A，et al.The effect of dietary lecithin and lipase，as a function of age，on n9 fatty acid incorporation in the tissue lipid of Sparus aurata larvae[J].Fish Physiol Biochem，1993，10：357-364.
[6] COUTTEAU P，GEURDEN I，CAMARA M R，et al.Review on the dietary effects of phospholipids in fish and crustacean larviculture[J].Aquaculture，1997，155：149-164.
[7] 成永旭，嚴生良，王武，等.饲料中磷脂和多不饱和脂肪酸对中华绒螯蟹大眼幼体育成仔蟹的成活率和生长的影响[J].水产学报，1998，22（1）：9-15.
[8] PAIBULKICHAKUL C，PIYATIRATITIVORAKUL S，KITTAKOOP P，et al.Optimal dietary levels of lecithin and cholesterol for black tiger prawn（Penaeus monodon）larvae and postlarvae[J].Aquaculture，1998，161：273-281. [9] BOURDIER G G，AMBLARD C A.Lipids in Acanthodiaptomus denticornis during starvation and fed on three different algae[J].J Plankton Res，1989，11：1201-1212.
[10] HEATH J R，BARNES H.Some changes in biochemical composition with season and during the moulting cycle of the common shore crab，Carcinus maenas （L）[J].J Exp Mar Biol Ecol，1970，5：199-233.
[11] STUCK K C，WATTS S A，WANG S Y.Biochemical responses during starvation and subsequent recovery in postlarval Pacific white shrimp，Penaeus vannamei[J].Mar Biol，1996，125：33-45.
[12] TESHIMA S，KANAZAWA A.Biosynthesis of sterols in the lobster，Panulirus japonicus，the prawn，Penaeus japonicus，and the crab，Portunus trituberculatus[J].Comp Biochem Physiol，1971，38B：597-602.
[13] DALL W，MORIARTY D J W.Nutrition and digestion[M]//MANTLE L H.The Biology of Crustacea.Vol.5.Internal Anatomy and Physilolgical Regulation：New York and London：Academic Press，1983：215-261.
[14] 溫小波，陈立侨.磷脂和胆固醇在虾蟹类营养中的研究进展[J].淡水渔业，2000，30（5）：25-27.
[15] GUARY J B，KANAZAWA A.Ditribution and fate of exogenous cholesterol during the molting cycle of the prawn Penaeus japonicus Bate[J].Comp Biochem Physiol，1973，46A：5-10.
[16] KANAZAWA A，TESHIMA S，TANAKA N.Nutritional requirements of prawnV：Requirements for choline and inositol[J].Memoirs of the Faculty of Fisheries of Kagoshima Universith，1976，25：47-51.
[17] 李淡秋.七种甲壳类水产品脂肪酸组成的分析研究[J].水产科技情报，1992，18（3）：73-76.
[18] 李荷芳，郝斌，王辉亮，等.野生对虾与养殖对虾脂肪酸组成和含量的比较[J].海洋科学，1993（1）：41-46.
[19] 翁幼竹，李少菁，王桂忠.饥饿对锯缘青蟹幼体生化组成的影响[J].厦门大学学报，2002，41（1）：84-88.
[20] KANUZAWA A，TESHIMA S，ONO K，et al.Biosynthesis of fatty acids from acetate in the prawns，Penaeus monodon and Penaeus merguiensis[J].Memoirs of the Faculth of Fisheries of Kagoshima Universith，1979，28：21-26.
[21] RITAR A J，DUNSTAN G A，BRADLEY J.Biochemical composition during growth and starvation of early larval stages of cultured spiny lobster（Jasus edwardsii）phyllosoma[J].Comp Biochem Physiol Part A，2003，136：353-370.
[22] NEW M B.A review of dietary studies with shrimp and prawns[J].Aquaculture，1976，9：101-144.
[23] NEW M B.A bibliography of shrimp and prawn nutrition[J].Aquaculture，1980，21：101-128.
[24] NEW M B.Feed and Feeding of Fish and ShrimpA Manual on the Preparation and Presentation of Compound Feeds for Shrimp and Fish in Aquaculture[R].Rome：ADCP/PEP/87/26 FAO，1987.
[25] MAGUIRE G B.A Review of the Farming and Biology of Penaeid Prawns with Emphasis on Juvenile School Prawns[R].Sydney：New South Wales State Fisheries Technical Report，1980. [26] KANAZAWA A.Nutrition of penaeid prawns and shrimps[C]//TAKI Y，PRIMAVERA J J，LLOBRERA J A，et al.Proceedings of the First International Conference on the Culture of Penaeid Prawns/Shrimps.SEAFDEC.Philippines：Iloilo City，1984：123-130.
[27] MCGILVERY R W.Biochemistry，a Functional Approach[M].Philadelphia：W.B.Saunders，1970.
[28] BARCLAY M C，DALL W，SMITH D M.Changes in lipid and protein during starvation and the moulting cycle in the tiger prawn，Penaeus esculentus Haswell[J].J Exp Mar Biol Ecol，1983，68：229-244.
[29] DALL W，SMITH D M.Oxygen consumption and ammoniaN excretion in fed and starved tiger prawns，Penaeus esculentus Haswell[J].Aquaculture，1986，55：23-33.
[30] DESHIMARU O，SHIGUENO K.Introduction to the artificial diet for prawn，Penaeus japonicus[J].Aquaculture，1972，1：115-133.
[31] CLAYBROOK D L.Nitrogen metabolism[M]//MANTEL L H.The Biology of Crustacea.5，Internal Anatomy and Physiological Regulation.New York and London：Academic Press，1983：163-213.
[32] TORRES C.Variations du pool des acides amines libres du muscle abdominal de Penaeus kerathurus au cours du cycle d'intermue，et au cours du jeune[J].Comp Biochem Physiol，1973，45B：1-12.
[33] DALL W，SMITH D M.Changes in proteinbound and free amino acids in the muscles of the tiger prawn Penaeus esculentus during starvation[J].Mar Biol，1987，95：509-520.
[34] DESHIMARU O.Protein and amino acid nutrition of the prawn Penaeus japonicus[C]//PRUDER G D，LANGDON C J，CONKLIN D E，et al.Proceedings of the Second International Conference on Aquaculture Nutrition：Biochemical and Physiological Approaches to Shellfish Nutrition.Baton Rouge，Louisiana：Louisiana State University，1982：106-123.
[35] TESHIMA S，KANAZAWA A，KAKUTA Y.Effects of dietary phospholipids on growth and body composition of the juvenile prawn[J].Bull Jap Soc Sci Fish，1986，52：55-158.
[36] CUZON G，CAHU C，ALDRIN J F，et al.Starvation effect on metabolism of Penaeus japonicus[J].Proc.World Maricult.Soc.，1980，11：410-423.
[37] REGNAULT M.Respiration and ammonia excretion of the shrimp Crangon crangon L.：Metabolic reponse to prolonged starvation[J].J Comp Physiol，1981，141：549-555.
[38] STEEVES H R.The effects of starvation on glycogen and lipid metabolismin the isopod Lirceus brachyurus（Harger）[J].J Exp Zool，1963，154：21-38.
[39] ZANDEE D I.Metabolism in the crayfish Astacus astacus （L）.The energy yielding metabolism[J].Archs Int Physiol Biochem，1966，74：45-57. [40] K PARVATHY.Carbohydrate metabolism of two crustaceans during starvation[J].Mar Biol，1971，8：1-5.
[41] BULOW F J.RNA-DNA ratios as indicators of recent growth rates of a fish[J].J Fish Res Bd Can，1987，27：2343-2349.
[42] WANG S Y，STICKLE W B.Changes in nucleic acid concentration with starvation in the blue crab Callinectes sapidus Rathbun[J].J Crustacean Biol，1986，6：49-56.
[43] MOSS S M.Use of nucleic acids as indicators of growth in juvenile white shrimp，Penaeus vannamei[J].Mar Biol，1994，120：359-367.
[44] JUINIO M A R，COBB J S，BENGTSON D，et al.Changes in nucleic acids over the molt cycle in relation to food availability and temperature in Homarus americanus postlarvae[J].Mar Biol，1992，114：1-10.
[45] FISHER L R.Vitamins[M]//WATERMAN T H.The Physiology of Crustacea.New York and London：Academic Press，1960：259-289.
[46] DESHIMARU O，KUROKI K.Studies on a purified diet for prawn-XIV：Requirement of prawn for dietary thiamine，pyridoxine，and choline chloride[J].Bull Jap Soc Sci Fish，1979，42：571-576.
[47] LIGHTNER D V，HUNTER B，MAGARELLI P C，et al.Ascorbic acid：Nutritional requirement and role in wound repair in penaeid shrimp[J].Proc World Maricul Soc，1979，10：513-528.
[48] HUNTER B P，MARGARELLI P C，LIGHTNER D V，et al.Ascorbic aciddependent collagen formation in penaeid shrimp[J].Comp Biochem Physiol，1979，64B：381-386.
关键词甲壳动物；生化组成；饥饿
中图分类号S185文献标识码A文章编号0517-6611（2014）14-04376-04
Effects of Starvation on Biochemical Composition of Crustacean
LIU Yu（Xiamen Environmental Protection Research Institute， Xiamen， Fujian 361006）
AbstractThis paper describes the effects of starvation on biochemical composition of crustacean， analyzes the effects on lipids， proteins， carbohydrates and nucleic acids during starvation.
Key wordsCrustacean； Biochemical composition； Starvation
由于环境变迁、季节更替以及食物分布在时空上的不均匀性，使自然界中的甲壳动物经常在其生命周期中面临食物资源短缺而受到饥饿胁迫。即使在饲养条件下，它们也会经受饥饿。因此，研究饥饿对甲壳动物机体生化组成的影响，不仅有助于揭示甲壳动物对饥饿胁迫的适应对策，而且对其资源管理及实践生产也有重要指导意义。甲壳动物是水生动物中的一个主要类群，其中一些种类已在世界广泛养殖，具有重要的经济价值。笔者综述了有关饥饿对甲壳动物机体中脂类、蛋白质、碳水化合物以及核酸等影响的研究进展，以期为深入研究其对饥饿适应的生理机制提供参考。
1饥饿对甲壳动物脂代谢的影响
脂类是甲壳动物生长发育所需能量的主要来源之一，也是其生物膜结构的重要成分，特别是其中的磷脂、三酰甘油、胆固醇和脂肪酸，对甲壳动物的成活和生长有重要影响，并与其蜕皮、生殖等生命活动密切相关。由于有些在甲壳动物体内不能合成或合成量过少，不能满足其生长发育的需要，因此需要通过外界饵料进行添加补充[1]。Moore等[2]在对虾不同生长时期进行不同程度投喂，发现其体脂含量对其饱食程度十分敏感，并随着饱食程度的降低而减少。
甲壳动物的体脂组成因种类而异，且受季节变化的影响。Vinagre和Da Silva[3]研究表明颗粒张口蟹（Chasmognathus granulate）似乎在春季与夏季以肝胰脏和肌肉的糖原为最主要代谢能源，而在秋季与冬季则以肌肉中的脂肪作为代谢能源。国内外学者已从脂类的生理意义和需求以及营养代谢等方面对甲壳动物脂类营养进行了研究。
磷脂是甲壳动物的主要脂类成分，如对虾体内磷脂含量占含脂量的47%[4]。磷脂也是细胞膜的主要成分。已有大量研究表明，甲壳动物在孵化后迅速生长、发育的这段时期需要丰富的磷脂来形成和更新细胞，尤其是甲壳动物幼体对磷脂的缺乏非常敏感。由于幼体自身生物合成的磷脂远远不能满足其需要，所以饵料中的磷脂作为外源性磷脂可以改善幼体内源性磷脂不足的情况，满足幼体对磷脂的需求。用缺乏磷脂的饲料投喂日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）的蚤状幼体，发现其在发育到糠虾幼体期前死亡率已达到100%[1]。由此可见，磷脂是甲壳动物尤其幼体阶段需要从外界大量摄取的一种必需营养物质。
磷脂包括磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰肌醇（PI）等种类。Kanazawa等推测磷脂的生理作用主要體现在以下方面：①为重新合成磷脂能力有限的虾蟹提供磷脂；②磷脂参与饵料脂类（如甘油三酯、胆固醇）的乳化，以利于它们的消化吸收；③磷脂是脂蛋白的必需组成成分，血淋巴中的脂蛋白对脂类在体内运输起重要作用[1]。由此可见，磷脂对甲壳动物的生长发育相当重要。磷脂的极性强，容易被乳化，也更容易与胆盐作用而被吸收，因此对于消化能力尚不完善的甲壳动物幼体，磷脂作为能量和必需脂肪酸（EFA）的来源比中性脂更好[5]。在饲料中添加1%的蛤粉磷脂，可以改善日本囊对虾幼体生长，但添加相同比例且相同来源的磷脂中获得的脂肪酸却没有类似的作用[6]。国内也有研究表明饲料中添加磷脂能显著提高中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）大眼幼体育成仔蟹的成活率，并能加速仔蟹的蜕皮，而添加多不饱和脂肪酸（PUFA）虽然可以提高大眼幼体到Ⅰ期仔蟹的成活率，但对提高大眼幼体到Ⅲ期仔蟹成活率的作用不显著[7]。磷脂改善生长、存活的作用在许多不同种类中都已经得到证实，如日本囊对虾、美洲螯龙虾（Homarus americanus）、中国明对虾（Fenneropenaeus chinensis）、斑节对虾（Penaeus monodon）、长毛明对虾（Penaeus penicillatus）、凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）、墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguieusis）、中华绒螯蟹等，饵料中磷脂都能不同程度提高其幼体的生长率和存活率 [6-8]。
有关甲壳动物饥饿期间脂类物质代谢的研究表明，饥饿阶段甲壳动物主要消耗中性脂，极性脂因参与细胞生物膜的构建而不被利用[9-10]；中性脂中三酰甘油（Triacylglycerol，TAG）作为主要贮能物质被利用。对凡纳滨对虾在饥饿期间体组成的研究表明，三酰甘油在饥饿的第1天就迅速被消耗[11]，表明三酰甘油能在短期饥饿时提供能量，而固醇（Sterol）作为生物膜的结构成分不被利用。因此，Stuck等建议使用三酰甘油/固醇比值来评价甲壳动物营养状况[11]。
胆固醇是性激素、蜕皮激素、肾上腺皮质激素、胆汁酸和维生素D的前体，具有重要的生理功能。通常情况下，甲壳动物缺乏将乙酸合成胆固醇的能力[12-13]，因而需要从外界摄取。这可从许多种类的相关研究得到证实，如无齿相手蟹（Seama dehaani）和三齿厚蟹（Helice tridens）、黄道蟹（Cancer pagurus）、欧洲螯龙虾（Homarus gammarus）[14]、日本囊对虾、日本龙虾（Panulirus japonicus）和三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）[12]等。虾蟹类的外源胆固醇则以游离固醇或酯化固醇的形式存在于体内[15-16]。Guary和Kanazawa[15]分别对处于蜕皮后期、蜕皮间期、蜕皮前期的日本囊对虾注射14C胆固醇，3 d后分析其血淋巴、眼及眼柄、外骨骼、真皮、中肠腺、肠道、性腺及肌肉的放射性强度，结果发现放射性物质主要集中在真皮组织和性腺，说明胆固醇与虾蟹类的蜕皮和生殖有关。胆固醇转化为蜕皮激素已在近方蟹（Hemigrapsus nudus）和美洲螯龙虾中通过同位素试验得到证实，且其合成代谢途径可能与昆虫蜕皮激素的生物合成和代谢途径相同[15]。 李淡秋[17]分别测定了中国明对虾、日本沼虾（Macrobrachium nipponense）、安氏白虾（Exopalaemon annandalei）、克氏原螯虾（Procambarus clarkii）、葛氏长臂虾（Palaemon gravieri）、中华绒螯蟹和三疣梭子蟹等7种甲壳动物的脂肪酸组成。这些种类脂肪酸组成的共同特征是：不饱和脂肪酸含量显著高于饱和脂肪酸，多稀酸在不饱和脂肪酸中含量甚高，约占不饱和脂肪酸总量的60%。上述7种甲壳动物隶属不同的科，脂肪酸组成的区别在于其含量不同。但同属对虾科的中国明对虾、日本囊对虾和斑节对虾，它们的脂肪酸组成也不同，大部分脂肪酸最大和最小含量之差都超过5.0%，其中20：4n6的差异最大，为12.8%[18]。日本囊对虾、中国明对虾及罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergi）可以在体内由脂肪酸合成磷脂，但这种体内合成的量远远不能满足其生长发育的需要，因此还需要由外源饵料进行补充。
锯缘青蟹（Scylla serrata）饥饿幼体同时动用蛋白质和脂类作为能量来源，且以脂类为主。当幼体饥饿时间超过1.5 d，脂类储存就已接近匮乏；饥饿的幼体明显地保留高度不饱和脂肪酸20：4n6和20：5n3（EPA），而22：6n3（DHA）的保留程度很低，饱和脂肪酸16：0、单不饱和脂肪酸16：1和18：1是主要的供能脂肪酸。由此可见，22：6n3（DHA）对早期幼体的生长发育是极为重要的[19]。
Vinagre和Da Silva[3]在对颗粒张口蟹进行饥饿处理前分别投喂高蛋白和高碳水化合物的食物，再对投喂2种不同饵料的蟹进行饥饿处理后的体组成分析表明脂肪均是饥饿期间的代谢能源。
Kanazawa等[20]在斑节对虾与墨吉明对虾中利用放射性同位素标记方法发现，18：2n6、18：3n3、20：5n3和22：6n3均未标记上放射性同位素，说明它们均为必需脂肪酸，应从体外获得[20]。
Arthur等[21]在红岩龙虾饥饿期间消耗大量的脂肪，而且主要以磷脂分解为主，固醇得以保留。脂肪酸含量也在第一次蜕皮到第Ⅳ期有了明显改变，说明了它们的必要性。通过对必需脂肪酸的了解，更加体现了对十八碳多不饱和脂肪酸的需求。
2饥饿对甲壳动物蛋白质代谢的影响
甲壳动物主要由蛋白质组成。以对虾为例，蛋白质是对虾天然饵料的主要组成成分。据此推测，对虾对蛋白质的需求量很高[22-26]。在对虾类中，对虾属（包括新对虾属）都可以认为是食肉动物。与其他食肉动物一样，这意味着对虾饵料中的蛋白质超过需求，过剩的蛋白质被氧化，产生能量[27]。这说明蛋白质对对虾类的能量供应是至关重要的。Arthur等[21]对红岩龙虾进行饥饿试验也证明了饥饿期间消耗了大量的蛋白质。
Barclay等[28]将这个概念应用于食用对虾（Penaeus esculentus）的试验，对虾在饥饿7 d后已代谢掉3倍于脂量的蛋白质，从而证实了蛋白质作为能量贮备的重要性。Dall和Smith[29]在一个类似的试验中发现，食用对虾饥饿5 d后氧/氮比已降至將近7∶1，表明氨基酸此时已成为唯一的能源。即使是饱食的对虾，氧/氮比也为13.6～16.4∶1，说明在正常时氨基酸也在氧化代谢中起主要作用。
由于饵料中大量的氨基酸被氧化，所以只要必需氨基酸需要量得到满足，蛋白质的质量和来源均显得无关紧要。对人工饵料蛋白质成分的营养研究表明饵料蛋白质的氨基酸组成应该与对虾组织相符合[30]。
许多海洋甲壳动物游离氨基酸（FAA）占氨基酸总量高达20%[31]。在分析蛋白质前的初步净化过程中，FAA中的氨基酸比例不同于蛋白质中氨基酸的比例；甘氨酸含量最大，与精氨酸、脯氨酸共占FAA总量的大约90%[32-33]。Torres发现饥饿使FAA发生变化[3-4]。Barclay等[28]研究表明，饥饿过程中腹部肌肉是参与代谢的主要组织，但Dall和Smith[33]发现肌肉总的氨基酸含量仅发生很少的变化，而许多FAA则发生显著变化。例如，饥饿15 d的甘氨酸含量增加，但脯氨酸含量几乎降至零。在饥饿过程中，水解肌肉蛋白质以产生能量，但其余蛋白质的氨基酸组成保持不变。从肌肉蛋白质水解得到的氨基酸成为FAA，进而可供氧化。FAA可能是正常饵料氨基酸氧化的途径，并且脯氨酸可能提供直接能源，这与其他无脊椎动物一样。
用结晶氨基酸替代蛋白质作为饲料，不能使对虾以合理的速度生长[34-35]，但在蛋白质中加入某些氨基酸后却能促进生长。例如，仅投喂酪蛋白，对虾生长不佳，但当加入精氨酸后对虾幼体的生长可与鲜活饵料产生的效果相比[36]。精氨酸在甲壳动物中起到一种腺苷酸的功能，因为甲壳动物不能自身合成，因此对其需求量较大。精氨酸在鸟氨酸循环中也与脯氨酸结合。海洋无脊椎动物的蛋白质大都含有较高含量的脯氨酸和精氨酸，当这些动物作为对虾饵料时，对虾生长迅速。由此可见，对虾饵料中蛋白质和氨基酸的氧化代谢还很不清楚，但可以确定需要量很大。
3饥饿对甲壳动物碳水化合物的影响
饥饿期间的主要能源供应不仅因种类而异，而且与该甲壳动物的营养史有关。在给颗粒张口蟹投喂高蛋白饵料后进行饥饿处理，发现血淋巴中的糖原和肝胰脏中的糖原并没有受到饥饿的影响。然而，肌肉糖原却在饥饿期间有所下降，而在投喂高碳水化合物饵料后肌肉和肝胰脏中的糖原则成为饥饿期间的主要能源基础[3]。褐虾（Lirceus brachyurus）和日本囊对虾在饥饿4周期间首先以碳水化合物为主要代谢能源[37-38]。褐虾（Lireus brachyurus）和河螯虾（Astacus astacus）在饥饿期间主要依靠碳水化合物提供能量[38-39]。在对海蟑螂饥饿1周后，发现游离糖原逐渐被消耗掉，而血液中的蛋白质结合糖原成分并没有改变，这表明只有游离糖原参与了营养生理作用[40]。 4饥饿对甲壳动物核酸的影响
RNA在蛋白质合成过程中起到重要作用，其含量反映了细胞内蛋白质合成速率，表现为机体体重的变化，而细胞内的DNA含量比较稳定。因此，RNA/DNA比值可以反映单位细胞的蛋白质合成速率。目前，该生理学指标被广泛用于评价水生动物的生长和营养状况[41-42]。大量研究表明，甲壳动物饥饿期间体内的RNA/DNA比值显著下降。但也有不少学者认为甲壳动物的蜕皮对RNA/DNA比值有很大影响[11，42]。Stuck等[11]提出通过限定某个蜕皮生理阶段或加大试验的样本数量来增加RNA/DNA比值在评价该类动物营养状态时的有效性。
试验表明，RNA和DNA的浓度以及RNA/DNA比值在凡纳滨对虾生长的5个阶段没有明显的变化。此外，RNA浓度和RNA/DNA比值被成功应用于区别未投喂、适量投喂和饱食投喂的凡纳滨对虾[43]。
对三疣梭子蟹的研究发现，在饥饿3 d内RNA浓度下降了31%，并在此后的30 d内持续下降最终达到正常投喂组的27%。DNA浓度在饥饿3～6 d下降21%，并在接下来的饥饿期间保持稳定。三疣梭子蟹在经过长期饥饿后表现了很高的恢复能力。DNA浓度在饥饿15和30 d并恢复投喂5 d后分别分别增长了35%和22%，而RNA浓度分别增长了129%和91%。RNA浓度和RNA/DNA比值是一个敏感的营养参数，尤其是在早期饥饿阶段[42]。
对美洲螯龙虾幼体而言，RNA/DNA比值对短期饥饿是一个很敏感的参数。然而这个比例对处于蜕皮C和DI期的蟹的投喂水平相符，而与温度规律相反[44]。
5饥饿对甲壳动物维生素组分的影响
6小结
在饥饿条件下，甲壳动物对机体贮能物质的动用是因种类而异，不同种类在饥饿阶段的主要能源物质有很大差异。对于一些淡水种类（如褐虾和河蟹虾），它们在饥饿期间主要依靠碳水化合物提供能量。绝大多数海水种类机体内碳水化合物含量很少，长期饥饿状态下它们主要由脂肪和蛋白质提供能量。对能源物质的动用是有先后顺序的，饥饿期间甲壳动物还可以交替利用机体能源物质。即使是同一种类，由于饥饿前营养史不同，它们在饥饿期间利用贮能物质的情况也有一定差异。
总而言之，目前饥饿对甲壳动物机体生化组成的影响并没有形成具体的规律，一些生理调节机制仍需要进一步研究。
安徽农业科学2014年参考文献
[1] KANAZAWA A，TESHIMA S，SAKAMOTO M.Effect of dietary lipids，fatty acids，and phospholipids on growth and survival of prawn（Penaeus japonicus）larvae[J].Aquaculture，1985，50：39-49.
[2] MOORE L E，SMITH D M，LONERAGAN N R.Blood refractive index and wholebody lipidcontent as indicators of nutritional condition for penaeid prawns（Decapoda：Penaeidae）[J].J Exp Mar Biol Ecol，2000，244：131-143.
[3] VINAGRE A S，DA SILVA R S M.Effects of starvation on the carbohydrate and lipid metabolism in crabs previously maintained on a high protein or carbohydraterich diet[J].Comp Biochem Physiol，1992，102（3）：579-583.
[4] CLARKE A，WICKINS J F.Lipid content and composition of cultured Penaeus merguiensis fed with animal food[J].Aquaculture，1980，20：17-27.
[5] KOVEN W M，KOLKOVSKI S，TANDLER A，et al.The effect of dietary lecithin and lipase，as a function of age，on n9 fatty acid incorporation in the tissue lipid of Sparus aurata larvae[J].Fish Physiol Biochem，1993，10：357-364.
[6] COUTTEAU P，GEURDEN I，CAMARA M R，et al.Review on the dietary effects of phospholipids in fish and crustacean larviculture[J].Aquaculture，1997，155：149-164.
[7] 成永旭，嚴生良，王武，等.饲料中磷脂和多不饱和脂肪酸对中华绒螯蟹大眼幼体育成仔蟹的成活率和生长的影响[J].水产学报，1998，22（1）：9-15.
[8] PAIBULKICHAKUL C，PIYATIRATITIVORAKUL S，KITTAKOOP P，et al.Optimal dietary levels of lecithin and cholesterol for black tiger prawn（Penaeus monodon）larvae and postlarvae[J].Aquaculture，1998，161：273-281. [9] BOURDIER G G，AMBLARD C A.Lipids in Acanthodiaptomus denticornis during starvation and fed on three different algae[J].J Plankton Res，1989，11：1201-1212.
[10] HEATH J R，BARNES H.Some changes in biochemical composition with season and during the moulting cycle of the common shore crab，Carcinus maenas （L）[J].J Exp Mar Biol Ecol，1970，5：199-233.
[11] STUCK K C，WATTS S A，WANG S Y.Biochemical responses during starvation and subsequent recovery in postlarval Pacific white shrimp，Penaeus vannamei[J].Mar Biol，1996，125：33-45.
[12] TESHIMA S，KANAZAWA A.Biosynthesis of sterols in the lobster，Panulirus japonicus，the prawn，Penaeus japonicus，and the crab，Portunus trituberculatus[J].Comp Biochem Physiol，1971，38B：597-602.
[13] DALL W，MORIARTY D J W.Nutrition and digestion[M]//MANTLE L H.The Biology of Crustacea.Vol.5.Internal Anatomy and Physilolgical Regulation：New York and London：Academic Press，1983：215-261.
[14] 溫小波，陈立侨.磷脂和胆固醇在虾蟹类营养中的研究进展[J].淡水渔业，2000，30（5）：25-27.
[15] GUARY J B，KANAZAWA A.Ditribution and fate of exogenous cholesterol during the molting cycle of the prawn Penaeus japonicus Bate[J].Comp Biochem Physiol，1973，46A：5-10.
[16] KANAZAWA A，TESHIMA S，TANAKA N.Nutritional requirements of prawnV：Requirements for choline and inositol[J].Memoirs of the Faculty of Fisheries of Kagoshima Universith，1976，25：47-51.
[17] 李淡秋.七种甲壳类水产品脂肪酸组成的分析研究[J].水产科技情报，1992，18（3）：73-76.
[18] 李荷芳，郝斌，王辉亮，等.野生对虾与养殖对虾脂肪酸组成和含量的比较[J].海洋科学，1993（1）：41-46.
[19] 翁幼竹，李少菁，王桂忠.饥饿对锯缘青蟹幼体生化组成的影响[J].厦门大学学报，2002，41（1）：84-88.
[20] KANUZAWA A，TESHIMA S，ONO K，et al.Biosynthesis of fatty acids from acetate in the prawns，Penaeus monodon and Penaeus merguiensis[J].Memoirs of the Faculth of Fisheries of Kagoshima Universith，1979，28：21-26.
[21] RITAR A J，DUNSTAN G A，BRADLEY J.Biochemical composition during growth and starvation of early larval stages of cultured spiny lobster（Jasus edwardsii）phyllosoma[J].Comp Biochem Physiol Part A，2003，136：353-370.
[22] NEW M B.A review of dietary studies with shrimp and prawns[J].Aquaculture，1976，9：101-144.
[23] NEW M B.A bibliography of shrimp and prawn nutrition[J].Aquaculture，1980，21：101-128.
[24] NEW M B.Feed and Feeding of Fish and ShrimpA Manual on the Preparation and Presentation of Compound Feeds for Shrimp and Fish in Aquaculture[R].Rome：ADCP/PEP/87/26 FAO，1987.
[25] MAGUIRE G B.A Review of the Farming and Biology of Penaeid Prawns with Emphasis on Juvenile School Prawns[R].Sydney：New South Wales State Fisheries Technical Report，1980. [26] KANAZAWA A.Nutrition of penaeid prawns and shrimps[C]//TAKI Y，PRIMAVERA J J，LLOBRERA J A，et al.Proceedings of the First International Conference on the Culture of Penaeid Prawns/Shrimps.SEAFDEC.Philippines：Iloilo City，1984：123-130.
[27] MCGILVERY R W.Biochemistry，a Functional Approach[M].Philadelphia：W.B.Saunders，1970.
[28] BARCLAY M C，DALL W，SMITH D M.Changes in lipid and protein during starvation and the moulting cycle in the tiger prawn，Penaeus esculentus Haswell[J].J Exp Mar Biol Ecol，1983，68：229-244.
[29] DALL W，SMITH D M.Oxygen consumption and ammoniaN excretion in fed and starved tiger prawns，Penaeus esculentus Haswell[J].Aquaculture，1986，55：23-33.
[30] DESHIMARU O，SHIGUENO K.Introduction to the artificial diet for prawn，Penaeus japonicus[J].Aquaculture，1972，1：115-133.
[31] CLAYBROOK D L.Nitrogen metabolism[M]//MANTEL L H.The Biology of Crustacea.5，Internal Anatomy and Physiological Regulation.New York and London：Academic Press，1983：163-213.
[32] TORRES C.Variations du pool des acides amines libres du muscle abdominal de Penaeus kerathurus au cours du cycle d'intermue，et au cours du jeune[J].Comp Biochem Physiol，1973，45B：1-12.
[33] DALL W，SMITH D M.Changes in proteinbound and free amino acids in the muscles of the tiger prawn Penaeus esculentus during starvation[J].Mar Biol，1987，95：509-520.
[34] DESHIMARU O.Protein and amino acid nutrition of the prawn Penaeus japonicus[C]//PRUDER G D，LANGDON C J，CONKLIN D E，et al.Proceedings of the Second International Conference on Aquaculture Nutrition：Biochemical and Physiological Approaches to Shellfish Nutrition.Baton Rouge，Louisiana：Louisiana State University，1982：106-123.
[35] TESHIMA S，KANAZAWA A，KAKUTA Y.Effects of dietary phospholipids on growth and body composition of the juvenile prawn[J].Bull Jap Soc Sci Fish，1986，52：55-158.
[36] CUZON G，CAHU C，ALDRIN J F，et al.Starvation effect on metabolism of Penaeus japonicus[J].Proc.World Maricult.Soc.，1980，11：410-423.
[37] REGNAULT M.Respiration and ammonia excretion of the shrimp Crangon crangon L.：Metabolic reponse to prolonged starvation[J].J Comp Physiol，1981，141：549-555.
[38] STEEVES H R.The effects of starvation on glycogen and lipid metabolismin the isopod Lirceus brachyurus（Harger）[J].J Exp Zool，1963，154：21-38.
[39] ZANDEE D I.Metabolism in the crayfish Astacus astacus （L）.The energy yielding metabolism[J].Archs Int Physiol Biochem，1966，74：45-57. [40] K PARVATHY.Carbohydrate metabolism of two crustaceans during starvation[J].Mar Biol，1971，8：1-5.
[41] BULOW F J.RNA-DNA ratios as indicators of recent growth rates of a fish[J].J Fish Res Bd Can，1987，27：2343-2349.
[42] WANG S Y，STICKLE W B.Changes in nucleic acid concentration with starvation in the blue crab Callinectes sapidus Rathbun[J].J Crustacean Biol，1986，6：49-56.
[43] MOSS S M.Use of nucleic acids as indicators of growth in juvenile white shrimp，Penaeus vannamei[J].Mar Biol，1994，120：359-367.
[44] JUINIO M A R，COBB J S，BENGTSON D，et al.Changes in nucleic acids over the molt cycle in relation to food availability and temperature in Homarus americanus postlarvae[J].Mar Biol，1992，114：1-10.
[45] FISHER L R.Vitamins[M]//WATERMAN T H.The Physiology of Crustacea.New York and London：Academic Press，1960：259-289.
[46] DESHIMARU O，KUROKI K.Studies on a purified diet for prawn-XIV：Requirement of prawn for dietary thiamine，pyridoxine，and choline chloride[J].Bull Jap Soc Sci Fish，1979，42：571-576.
[47] LIGHTNER D V，HUNTER B，MAGARELLI P C，et al.Ascorbic acid：Nutritional requirement and role in wound repair in penaeid shrimp[J].Proc World Maricul Soc，1979，10：513-528.
[48] HUNTER B P，MARGARELLI P C，LIGHTNER D V，et al.Ascorbic aciddependent collagen formation in penaeid shrimp[J].Comp Biochem Physiol，1979，64B：381-386.