【摘 要】
：
目的 构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因修饰的脐带间充质干细胞(TRAIL-MSCs),并检测其联合地塞米松(DEX)对急性T淋巴细胞白血病细胞系(Jurkat)的影响.方法 通过慢病毒载体将SPD-TRAIL基因转染脐带间充质干细胞(UC-MSCs)构建TRAIL-MSCs,使其能够表达十二聚体TRAIL蛋白(dTRAIL).通过CCK-8法、流式细胞术检测 UC-MSCs、TRAIL-MSCs、DEX(200 μmol/L)、DEX(200 μmol/L)+UC-MSCs 和 DEX(
【机 构】
：
北京贝来生物科技有限公司,北京 100176;北京市亦创生物技术产业研究院干细胞与再生医学研究所,北京 100176;河北医科大学第二医院血液科,河北石家庄 053600
论文部分内容阅读
目的 构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因修饰的脐带间充质干细胞(TRAIL-MSCs),并检测其联合地塞米松(DEX)对急性T淋巴细胞白血病细胞系(Jurkat)的影响.方法 通过慢病毒载体将SPD-TRAIL基因转染脐带间充质干细胞(UC-MSCs)构建TRAIL-MSCs,使其能够表达十二聚体TRAIL蛋白(dTRAIL).通过CCK-8法、流式细胞术检测 UC-MSCs、TRAIL-MSCs、DEX(200 μmol/L)、DEX(200 μmol/L)+UC-MSCs 和 DEX(200 μmol/L)+TRAIL-MSCs对Jurkat细胞增殖、凋亡的影响;显微镜光镜下观察细胞形态及密度;通过实时荧光定量PCR及Western blotting法检测各组Jurkat细胞表面死亡受体DR4、DR5 mRNA和蛋白表达水平.结果 CCK-8结果显示,各处理组均可以抑制Jurkat细胞的增殖,与对照组比较有显著性差异(P＜0.01);同时,DEX可以提高TRAIL-MSCs(抑制率约20％)对Jurkat细胞的增殖抑制作用,抑制率提高至60％,与TRAIL-MSCs组比较差异显著(P＜0.01).显微镜观察结果发现,DEX与TRAIL-MSCs联合组对肿瘤细胞Jurkat的杀伤作用最明显;流式细胞术结果显示,TRAIL-MSCs对Jurkat细胞有促进凋亡的作用,凋亡率达10％,单独使用DEX后,凋亡率约20％,与对照组比较差异显著(P＜0.01);DEX联合TRAIL-MSCs作用于Jurkat细胞48 h后,细胞凋亡率为38％,较TRAIL-MSCs组显著提高(P＜0.01).TRAIL-MSCs组DR4、DR5的mRNA、蛋白水平较对照组显著降低(P＜0.01),DEX组DR4、DR5的mRNA、蛋白水平较对照组显著升高(P＜0.01),DEX与TRAIL-MSCs联合作用后,DR4、DR5的mRNA、蛋白水平较DEX组显著降低(P＜0.01).结论 DEX可以提高肿瘤细胞Jurkat对TRAIL-MSCs的敏感性,增强TRAIL-MSCs对肿瘤细胞的杀伤作用,可能与提高DR4、DR5表达有关.
其他文献
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有自我更新及多向分化潜能的干细胞.MSCs具有对多种肿瘤组织归巢及定向迁移的特性,可以将其作为治疗肿瘤药物的载体,用来治疗无法通过手术去除的肿瘤;同时,MSCs自身参与重塑肿瘤微环境,影响其侵袭、增殖和转移等生物学行为,并且具有抗炎及损伤组织修复的能力.肿瘤坏死因子相关凋亡配体(TRAIL/Apo2L)作为诱导细胞凋亡的肿瘤坏死因子家族成员之一,可通过结合肿瘤细胞表面两个特异性死亡受体(DR4、DR5),特异激活肿瘤细胞凋亡.T
阿加曲班为一种直接凝血酶抑制剂,通过抑制纤维蛋白形成,血小板聚集,凝血因子Ⅴ、Ⅷ和Ⅻ和蛋白C的活性,发挥其抗凝血作用,不但灭活液相凝血酶,还能够灭活与纤维蛋白血栓结合的凝血酶.阿加曲班对凝血酶具有高度亲和性,具有无抗原性、构效关系明确、半衰期短、临床使用安全等特点.可用于急性缺血性脑卒中、经皮冠状动脉介入术、慢性动脉闭塞症和肝素诱导血小板减少症等的治疗.阿加曲班还通过对凝血酶的抑制,发挥抗炎、抑制血栓形成和抑制肿瘤转移等的作用.此外,阿加曲班还有非凝血酶抑制作用,如扩张血管和改善微循环等,以及潜在的抗病毒
化学药品注射剂生产过程使用的塑料组件系统与药液接触后可能产生相关浸出物,进而影响产品质量甚至危害患者安全.结合国内外已发布的相关标准及指南,对化学药品注射剂生产用的塑料组件系统(如硅胶管、滤器等)相容性研究的一般思路进行介绍.认为制剂申请人作为责任主体,应基于风险评估及必要时的试验研究,确认化学药品注射剂生产中使用的塑料组件系统的适用性.总结了目前申报资料中发现的相容性研究存在的问题,以期为药品研发及生产企业提供指导和帮助.
为了解中药淫羊藿的研究现状、热点及发展趋势,为后续研究提供直观便捷的数据参考依据和相关建议,收集2000-2020年万方数据知识服务平台、中国学术期刊全文数据库(CNKI)以及Web of Science(WOS)核心合集数据库中淫羊藿相关的研究文献并进行文献计量分析.结果显示,淫羊藿相关研究领域年度发文量总体为波动上升趋势,年发文量相对稳定.其中,中文文献以淫羊藿苷为主的关于淫羊藿有效成分的提取测定、网络药理学研究及对骨质疏松症等骨科疾病的治疗研究为当前淫羊藿相关研究领域的3大热点研究方向;英文文献以淫
目的 基于网络药理学探讨麻黄治疗心力衰竭的作用靶点及通路.方法 在TCMSP数据库中筛选麻黄有效成分及作用靶点,通过Uniprot数据库对靶点进行标准化处理.通过GeneCards、OMIM、TTD、Drugbank数据库筛选心力衰竭疾病相关靶点,将药物的作用靶点与疾病靶点进行交集,获得药物-疾病共同靶点,利用STRING数据库进行蛋白质相互作用分析(PPI),并通过Cytoscape3.8.0软件进行拓扑学分析.最后运用Metascape数据平台、David数据库对共同靶点进行GO及KEGG富集分析得出
目的 探讨阿加曲班联合阿司匹林治疗高危非致残性缺血性脑血管病(HR-NICE)的有效性及安全性.方法 前瞻性纳入2019年1月-2020年12月苏州市立医院北区收治的248例HR-NICE患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者随机分为联合组(n=123)及双抗组(n=125).联合组患者采用阿加曲班注射液静脉滴注(前48 h每日60 mg连续静脉滴注,后5 d每日20mg分2次静脉滴注,共7d)联合口服阿司匹林肠溶片100mg/d治疗.双抗组采用阿司匹林联合硫酸氢氯吡格雷片(氯吡格雷首剂300mg,后阿
目的 研究注射用血栓通(冻干)(XST)减轻糖尿病大鼠海马神经损伤的作用.方法 ip链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和XST(50 mg/kg)组,每组10只,另随机取10只SD大鼠为对照组.ip给药,每天给药1次,于屏障环境中连续给药60 d,对照组和模型组大鼠ip等量生理盐水.常规HE染色观察大鼠海马CA1区细胞的形态;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对海马Bax、Bcl-2、Bcl-x1、脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、神经突触
目的 探讨补骨脂乙醇提取物(PCEE)对人T细胞亚群增殖和活化的影响.方法 采集健康人EDTA抗凝血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),ADD染色流式细胞术检测PCEE(1、2mg/mL)对PBMCs的毒性;PBMCs分为对照组、模型组、PCEE(1 mg/mL)组,模型组和PCEE组用植物血凝素(PHA)5 μg/mL刺激,对照组不加;3 d后PCEE组加入终质量浓度为1mg/mL的PCEE作用48h,对照组和模型加入等体积的PBS.48h后收集细胞,用流式细胞术检测CD4+和CD8+T细胞亚群增殖(
何首乌Polygonum multiforum Thunb.是常用滋补中药,广泛应用于临床和保健产品,但是近年来不时出现何首乌及其制品致肝损伤的报道,引起关注.通过整理分析关于生首乌和制首乌的国内外相关报道,从生首乌和制首乌致肝毒性的物质基础(水提物、醇提物、二苯乙烯苷、蒽醌类化合物和没食子酸等)归纳总结其致肝毒性的药理作用研究进展.发现生首乌和制首乌的混淆以及长期高剂量给药可能是致肝损伤的主要原因.在不同病理动物和细胞模型中总结分析何首乌化学成分,发现其化学成分的结构以及成分之间的相互作用也是致肝损伤的
药品抽检是中国以及欧美等发达国家和地区重要的药品监管手段之一.我国药品监管部门颁布了一系列政策,建立了药品质量风险排查处置机制,对探索性研究中发现严重药品质量风险进行控制,取得了良好的成效.通过对国家药品抽检探索性研究概况、药品质量风险排查处置机制基本情况、政策法规、发挥的作用等方面的介绍,对国家药品抽检药品质量风险排查处置机制进行分析与探讨,建议在今后的工作中进一步提高探索性研究的科学性,加强探索性研究方法的转化,提高现场检查的针对性,提高该机制的法律效力.