论文部分内容阅读
摘 要：盐酸左氧氟沙星具有抗菌谱广，抗菌作用强的特点，它的主要作用机理是通过抑制细菌DNA旋转酶（细菌拓扑异构酶Ⅱ）的活性，阻碍细菌的复制而达到抗菌作用。方法：采用安捷伦C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15），检测波长为294nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。结论：本法简便、准确，可用于盐酸左氧氟沙星片中盐酸左氧氟沙星的含量测定。
关键词：盐酸左氧氟沙星片；含量；测定
盐酸左氧氟沙星片为氧氟沙星的左旋体，其抗菌活性约为氧氟沙星的两倍，对大肠埃希菌、沙门氏菌属、枸橼酸杆菌、不动杆菌属以及铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、克雷伯菌属、志贺菌属、流感嗜血杆菌、淋病菌等有较强的抗菌活性。盐酸左氧氟沙星片适用于呼吸系统感染、泌尿系统感染、生殖系统感染、皮肤软组织感染、肠道感染、败血症、粒细胞减少及免疫功能低下等。本实验采用高效液相色谱法對盐酸左氧氟沙星片中的盐酸左氧氟沙星的进行了含量测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器：HS11-1电热恒温水浴锅（上海昨非实验室设备有限公司）；Waters2695高效液相色谱仪（北京京科瑞达科技有限公司）；液相柱温箱（滕州市滕海分析仪器有限公司）；TH-UP实验室专用高纯水机（滕州市滕海分析仪器有限公司）；德安特分析天平0.1mg（上海升徽电子有限公司）；精密电子天平（厦门德量检测仪器有限公司）；721可见光分光光度计（四川赛恩思仪器有限公司）；SB25-12D超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。
1.2 色谱柱：安捷伦C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：青霉素购自中国药品生物制品检定所。
1.4 试剂：甲醇（青岛雅各化学试剂销售有限公司）、乙腈（青岛雅各化学试剂销售有限公司）、冰醋酸（青岛雅各化学试剂销售有限公司）、磷酸二氢钠（济南汇丰达化工有限公司）、三乙胺（济南汇丰达化工有限公司）、磷酸（济南汇丰达化工有限公司）、醋酸铵（济南汇丰达化工有限公司）、高氯酸钠（济南汇丰达化工有限公司）、盐酸（济南汇丰达化工有限公司）。
1.5 试药：盐酸左氧氟沙星片。
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-6]。流动相：醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15），检测波长：294nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按盐酸左氧氟沙星峰计算应不得低于2000。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取盐酸左氧氟沙星对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含10？滋g的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取盐酸左氧氟沙星片适量，研细，精密称取，加5毫升0.1mol/l盐酸溶液，超声1分钟，过滤，滤液转移至10毫升容量瓶内，即得。
2.4 专属性试验
取微晶纤维素、淀粉、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁等制成阴性样品，依上述方法测定，结果在盐酸左氧氟沙星出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 精密度试验
精密称取盐酸左氧氟沙星对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为10？滋g·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.68%，表明本方法精密度良好。
2.6 对照品的线性考察
精密称取盐酸左氧氟沙星对照品15mg，置250ml容量瓶中，加入流动相溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.5、1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，盐酸左氧氟沙星在6～60？滋g·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7 准确度试验
精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的盐酸左氧氟沙星对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.1%，RSD=0.92%。结果表明此方法的回收率良好。
3 结论
盐酸左氧氟沙星用药期间可能出现恶心、呕吐、腹部不适、腹泻、食欲不振、腹痛、消化不良、荨麻疹、发热感、皮疹、搔痒、红斑、视觉异常、耳鸣、幻觉、嗜睡、失眠、头晕、头痛等症状。对盐酸左氧氟沙星片质量控制至关重要。实验还分别考察磷酸盐缓冲液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=3.0）-乙腈（85：15），醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（80：20），磷酸二氢钾（磷酸调pH2.8）-乙晴（80：20），磷酸二氢钾（磷酸调pH2.8）-甲醇（80：20），磷酸二氢钾（磷酸调pH2.8）-乙晴（82：18）磷酸二氢钾（磷酸调pH3.0）-乙晴（82：18），乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液 （pH6.5）（36：64），醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）不同比例的流动相，结果以醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）为流动相。本实验表明此方法可用于盐酸左氧氟沙星片中盐酸左氧氟沙星的含量测定。盐酸左氧氟沙星片中盐酸左氧氟沙星的含量为标示量的95-105%。
参考文献
[1]张进，吴心雨，贾宏新.漫反射傅里叶变换红外光谱法测定制剂中左氧氟沙星[J].分析试验室，2017（03）.
[2]张忠君，韩铭，刘晖，吴歌，杨丽娟.高效液相色谱法测定氧氟沙星滴眼液的含量和有关物质[J].中国实用医药，2010（12）.
[3]王海燕，徐宏祥，徐善超.离子对-反相高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星胶囊的含量[J].中国药业，2002（09）.
[4]李洁，李翔.软性角膜接触镜中盐酸左氧氟沙星饱和吸附量的测定[J].实用药物与临床，2015（10）.
[5]张明玥，李新霞，王伟萍，刘扬.光纤传感过程分析比较不同厂家盐酸左氧氟沙星片溶出度[J].新疆医科大学学报，2013（05）
[6]刘世萍，马妍妍，郭美华，白建海，杨丽杰，王琪.HPLC法测定复方盐酸左氧氟沙星滴眼液中3组分的含量[J].中国药师，2013（11）
关键词：盐酸左氧氟沙星片；含量；测定
盐酸左氧氟沙星片为氧氟沙星的左旋体，其抗菌活性约为氧氟沙星的两倍，对大肠埃希菌、沙门氏菌属、枸橼酸杆菌、不动杆菌属以及铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、克雷伯菌属、志贺菌属、流感嗜血杆菌、淋病菌等有较强的抗菌活性。盐酸左氧氟沙星片适用于呼吸系统感染、泌尿系统感染、生殖系统感染、皮肤软组织感染、肠道感染、败血症、粒细胞减少及免疫功能低下等。本实验采用高效液相色谱法對盐酸左氧氟沙星片中的盐酸左氧氟沙星的进行了含量测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器：HS11-1电热恒温水浴锅（上海昨非实验室设备有限公司）；Waters2695高效液相色谱仪（北京京科瑞达科技有限公司）；液相柱温箱（滕州市滕海分析仪器有限公司）；TH-UP实验室专用高纯水机（滕州市滕海分析仪器有限公司）；德安特分析天平0.1mg（上海升徽电子有限公司）；精密电子天平（厦门德量检测仪器有限公司）；721可见光分光光度计（四川赛恩思仪器有限公司）；SB25-12D超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。
1.2 色谱柱：安捷伦C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：青霉素购自中国药品生物制品检定所。
1.4 试剂：甲醇（青岛雅各化学试剂销售有限公司）、乙腈（青岛雅各化学试剂销售有限公司）、冰醋酸（青岛雅各化学试剂销售有限公司）、磷酸二氢钠（济南汇丰达化工有限公司）、三乙胺（济南汇丰达化工有限公司）、磷酸（济南汇丰达化工有限公司）、醋酸铵（济南汇丰达化工有限公司）、高氯酸钠（济南汇丰达化工有限公司）、盐酸（济南汇丰达化工有限公司）。
1.5 试药：盐酸左氧氟沙星片。
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-6]。流动相：醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15），检测波长：294nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按盐酸左氧氟沙星峰计算应不得低于2000。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取盐酸左氧氟沙星对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含10？滋g的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取盐酸左氧氟沙星片适量，研细，精密称取，加5毫升0.1mol/l盐酸溶液，超声1分钟，过滤，滤液转移至10毫升容量瓶内，即得。
2.4 专属性试验
取微晶纤维素、淀粉、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁等制成阴性样品，依上述方法测定，结果在盐酸左氧氟沙星出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 精密度试验
精密称取盐酸左氧氟沙星对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为10？滋g·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.68%，表明本方法精密度良好。
2.6 对照品的线性考察
精密称取盐酸左氧氟沙星对照品15mg，置250ml容量瓶中，加入流动相溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.5、1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，盐酸左氧氟沙星在6～60？滋g·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7 准确度试验
精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的盐酸左氧氟沙星对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.1%，RSD=0.92%。结果表明此方法的回收率良好。
3 结论
盐酸左氧氟沙星用药期间可能出现恶心、呕吐、腹部不适、腹泻、食欲不振、腹痛、消化不良、荨麻疹、发热感、皮疹、搔痒、红斑、视觉异常、耳鸣、幻觉、嗜睡、失眠、头晕、头痛等症状。对盐酸左氧氟沙星片质量控制至关重要。实验还分别考察磷酸盐缓冲液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=3.0）-乙腈（85：15），醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（80：20），磷酸二氢钾（磷酸调pH2.8）-乙晴（80：20），磷酸二氢钾（磷酸调pH2.8）-甲醇（80：20），磷酸二氢钾（磷酸调pH2.8）-乙晴（82：18）磷酸二氢钾（磷酸调pH3.0）-乙晴（82：18），乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液 （pH6.5）（36：64），醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）不同比例的流动相，结果以醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用醋酸铵高氯酸钠溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）为流动相。本实验表明此方法可用于盐酸左氧氟沙星片中盐酸左氧氟沙星的含量测定。盐酸左氧氟沙星片中盐酸左氧氟沙星的含量为标示量的95-105%。
参考文献
[1]张进，吴心雨，贾宏新.漫反射傅里叶变换红外光谱法测定制剂中左氧氟沙星[J].分析试验室，2017（03）.
[2]张忠君，韩铭，刘晖，吴歌，杨丽娟.高效液相色谱法测定氧氟沙星滴眼液的含量和有关物质[J].中国实用医药，2010（12）.
[3]王海燕，徐宏祥，徐善超.离子对-反相高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星胶囊的含量[J].中国药业，2002（09）.
[4]李洁，李翔.软性角膜接触镜中盐酸左氧氟沙星饱和吸附量的测定[J].实用药物与临床，2015（10）.
[5]张明玥，李新霞，王伟萍，刘扬.光纤传感过程分析比较不同厂家盐酸左氧氟沙星片溶出度[J].新疆医科大学学报，2013（05）
[6]刘世萍，马妍妍，郭美华，白建海，杨丽杰，王琪.HPLC法测定复方盐酸左氧氟沙星滴眼液中3组分的含量[J].中国药师，2013（11）