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目的
观察沉默信息调节因子1 (SIRT1)对肠缺氧上皮Caco-2细胞屏障功能的影响并探讨其分子机制。
方法对Caco-2细胞分别进行1 %O2浓度缺氧6 h(缺氧组)和常规处理(常规组)及加浓度为40 μmol/L Resveratrol (SIRT1激动剂)预处理6 h后再缺氧6 h(观察组),分别检测3组肠上皮细胞跨上皮电阻(TER),PCR及Western blot分别检测3组SIRT1及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的mRNA与蛋白表达。
结果缺氧组SIRT1 mRNA及其蛋白的相对表达量均明显低于常规组(分别为0.40±0.02比0.70±0.07,P=0.001 ;0.37±0.03比0.76±0.03,P=0.001),也明显低于观察组(0.50±0.02,P=0.026 ;0.54±0.02,P=0.011)。缺氧组3种紧密连接蛋白mRNA表达均低于常规组(P<0.05),也低于观察组(P<0.05),观察组的ZO-1及Claudin-1表达与常规组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3种紧密连接蛋白的表达水平常规组最高,观察组次之,缺氧组最低,两两比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。常规组、缺氧组和观察组的TER分别为(142±7)Ohm/cm2、(94±3)Ohm/cm2和(119±7)Ohm/cm2;两两比较,差异均具有统计学意义(均P< 0.05)。
结论缺氧条件下SIRT1水平降低,而SIRT1的激活可通过增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1 mRNA与蛋白的表达,从而减轻缺氧对肠上皮屏障功能的损伤。