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目的制备粉尘螨(Dermatophagoides farinae)壳聚糖纳米疫苗,并观察其免疫治疗哮喘小鼠的效果。方法采用离子凝胶法制备粉尘螨壳聚糖纳米疫苗。30只BALB/c小鼠随机均分为5组,阴性对照组(A组)用生理盐水处理,其余组用50μg粉尘螨粗提液+2mg氢氧化铝腹腔注射致敏,第28天开始分别用PBS(B组,模型组)、空白壳聚糖(C组)、粉尘螨变应原(Der f)组(D组,1mg/次)和粉尘螨壳聚糖纳米疫苗(DCN)(E组,负荷1mg Der f的DCN/次)舌下含服免疫18次,每次间隔1d,末次免疫后1周用50μg粉尘螨变应原滴鼻激发,每天1次,连续7次。末次激发后24 h检测小鼠的气道高反应性;末次激发后48 h处死小鼠,取血,行肺泡灌洗,无菌摘取肺组织和脾脏;计数小鼠肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸粒细胞数,观察BALF和脾细胞上清中IL-4、IL-10和IFN-γ细胞因子水平,血清中IgE、IgA和IgG2a抗体水平;运用HE染色观察肺部炎症细胞的浸润程度,运用MTT法检测脾细胞的淋巴细胞增殖反应,计算刺激指数(SI)。结果与B组相比,D、E组气道高反应性和肺部病理改变减轻。D组(36.50×104/ml,3.72×104/ml)和E组(34.25×104/ml,2.25×104/ml)的BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数显著少于B组(61.67×104/ml,14.17×104/ml)(P<0.05)。与B组(IgE:0.39,IgA:0.79)相比,D组和E组血清中抗原特异性IgE抗体水平(D:0.22,E:0.22)显著降低,而IgA抗体水平(D:0.88,E:1.03)显著升高。D组和E组的BALF中IL-4水平(D:28.49pg/ml,E:20.93pg/ml)和脾细胞分泌的IL-4(D:27.82pg/ml,E:20.80pg/ml)水平均显著低于B组(56.33pg/ml,45.84pg/ml)(P<0.05)。而BALF中的IFN-γ(D:18.80 pg/ml,E:37.32 pg/ml)、IL-10(D:118.90pg/ml,E:129.15pg/ml)水平显著高于B组(13.60pg/ml,29.61 pg/ml)(P<0.05);脾细胞分泌的IFN-γ(D:20.68 pg/ml,E:42.42 pg/ml)、IL-10(D:36.31 pg/ml,E:161.37 pg/ml)水平亦显著高于B组(13.50pg/ml,22.52pg/ml)(P<0.05)。与B组(SI:0.23)相比,D组(SI:0.14)和E组(SI:0.13)的淋巴细胞增殖反应明显抑制。而C组(SI:0.22)对致敏小鼠无明显疗效。结论粉尘螨壳聚糖纳米疫苗对致敏小鼠具有免疫治疗作用。