【摘 要】
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目的:探究壮药龙盘止咳方减轻急性支气管炎小鼠肺损伤的潜在机制.方法:KM小鼠采用烟熏法建立急性支气管炎模型,将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、SB203580(p38 MAPK特异性抑制剂,5 mg/kg)组、高剂量(10.4 g/kg)龙盘止咳方组、低剂量(5.2 g/kg)龙盘止咳方组和龙盘止咳方(10.4 g/kg)+SB203580(5 mg/kg)组,每组12只,另将正常饲养的12只小鼠设为对照组.分组完成后进行药物干预,每天1次,连续1周.观察给药前后各组小鼠的一般状态变化;收集支气管肺泡
【机 构】
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广西中医药大学壮医药学院,广西南宁530001;广西国际壮医医院儿科,广西南宁530200;茂名市中医院儿科,广东茂名525000;广西中医药大学第一附属医院儿科,广西南宁530023
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目的:探究壮药龙盘止咳方减轻急性支气管炎小鼠肺损伤的潜在机制.方法:KM小鼠采用烟熏法建立急性支气管炎模型,将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、SB203580(p38 MAPK特异性抑制剂,5 mg/kg)组、高剂量(10.4 g/kg)龙盘止咳方组、低剂量(5.2 g/kg)龙盘止咳方组和龙盘止咳方(10.4 g/kg)+SB203580(5 mg/kg)组,每组12只,另将正常饲养的12只小鼠设为对照组.分组完成后进行药物干预,每天1次,连续1周.观察给药前后各组小鼠的一般状态变化;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18水平;HE染色观察肺组织病理学变化;免疫组化法检测肺组织核因子κB(NF-κB)p65的阳性表达;RT-qPCR检测肺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平;Western blot检测肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/NF-κB/NLRP3通路相关蛋白的表达.结果:与对照组相比,模型组小鼠出现咳嗽、流涕、呼吸急促等症状,且肺部支气管可见炎性细胞浸润、肺泡壁和支气管壁增厚、黏膜充血和水肿等病理损伤,肺组织NF-κB p65在胞核中呈强阳性表达,BALF中TNF-α、IL-1β和IL-18水平,肺组织NLRP3、IL-1β、ASC和caspase-1的mRNA表达水平,以及p-p38 MAPK/p38 MAPK、胞核NF-κB p65、NLRP3和cleaved caspase-1蛋白水平显著升高(P<0.05),胞质NF-κB p65蛋白水平显著降低(P<0.05).与模型组相比,高、低剂量龙盘止咳方组和SB203580组小鼠咳嗽、流涕、呼吸急促等症状,以及肺部支气管炎症细胞浸润等病理损伤明显减轻,肺组织胞核NF-κB p65呈阳性表达的细胞数减少,BALF中TNF-α、IL-1β和IL-18水平,肺组织NLRP3、IL-1β、ASC和caspase-1的mRNA表达水平,以及p-p38 MAPK/p38 MAPK、胞核NF-κB p65、NLRP3和cleaved caspase-1蛋白水平显著降低(P<0.05),胞质NF-κB p65蛋白水平显著升高(P<0.05).且龙盘止咳方和SB203580联合应用对p38 MAPK/NF-κB/NLRP3通路及肺部炎症的抑制作用均优于单独应用.结论:壮药龙盘止咳方可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB/NLRP3通路的激活,减少肺部炎症细胞因子的产生,从而减轻急性支气管炎小鼠肺损伤.
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