腺病毒介导的人HGF转染大鼠骨髓间充质干细胞及其作用研究

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目的 :评价携带HGF基因的腺病毒载体转染鼠骨髓间充质干细胞 (MSC)的效率 ,以及转染HGF基因对MSC增殖与分化的影响。方法 :采用荧光显微镜及流式细胞术检测转染效果和转染率 ;采用ELISA方法检测转染后HGF的表达情况 ;细胞增殖分析采用MTT法 ;MSC向成骨细胞分化采用碱性磷酸酶染色法。结果 :转染效率与病毒滴度 (MOI)具有量效关系 ,随着MOI的增加 ,转染率明显增高 ,当MOI =4 0 0时 ,转染率可达 99.99%。转染HGF后 ,MSC表达HGF明显增高 ,4 8h可达 12 8ng ml,随后逐渐下降并维持 2周以上 ;转染HGF对MSC的增殖以及向成骨分化没有影响。结论 :MSC是一种理想的基因载体细胞 ,可用于HGF的基因治疗。
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