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摘要：目的：探讨凝聚胺技术在临床输血检验中的重要性和应用价值。方法：选取2009年8月份到2010年8月份来我院住院需要输血的含不完全抗体的血清标本17例进行检测，检测方法使用盐水介质配血法和凝聚胺法，比较两种方法的检出率。结果：凝聚胺法的检出率为70.6%，盐水介质配血法的检出率为52.9%，两组对比具有统计学差异（P<0.05）。结论：凝聚胺法反应较盐水法灵敏度高，能检测几乎所有规则与不规则血型抗体，适用于各类输血患者的配血，值得临床广泛应用。
关键词：凝聚胺技术；临床输血；检验；重要性；应用途径
中图分类号：R826.2+6 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2013）3-026-02
随着临床医学的发展，输血在医学和抢救中起着极为重要的作用。输血有治疗和抢救生命的作用，同时会产生有害的作用，如何发挥输血的有效治疗作用，预防其有害作用，保证输血安全，是临床输血的重要课题。
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间[1]。
交叉配血实际上是检查不配合性，使病人，献血者血液之间没有可测到的不相配合的抗原，抗体成分，试验应在37°C下进行。试验方法除作盐水介质外，还有抗球蛋白试验法、酶法、凝聚胺法或其改良法。在配血的任何步骤中均不产生溶血或凝集鲜血者的血液才能给予病人输注[2]。
本文为了探讨凝聚胺技术在临床输血检验中的重要性和应用价值，做一系列研究，现报告如下：
1材料和方法
1.1试剂和器材：凝聚胺试剂盒；生理盐水；小试管；滴管；试管架；记号笔；显微镜；离心机。
1.2操作：供受者红细胞用生理盐水配成3-5%的细胞悬液。加样量均为：血清100微升，红细胞悬液50微升。取试管两支，表明主侧次侧，主侧管加受血者血清（血浆）1滴，和供血者3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管受血者3-5%红细胞悬液加供血者血清（血浆）1滴。各加LIM溶液3滴，混合均匀后，再各加凝聚胺溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟或参照说明书，普通离心机1000转离心15秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1液体。轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。最后加入凝聚胺2滴，轻轻转动试管混匀并同时观察结果。
1.3结果判定：如果在30秒内（或按说明书）凝集散开，代表是由凝聚胺引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不想合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
1.4注意事项：可以用EDTA抗凝血浆代替血清使用；若受血者血清含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴凝聚胺溶液以中和肝素；试剂使用前请放置至室温平衡后再行操作。在冬天室温极低的情况下进行交叉配血试验操作，由于某些受血者血清中可能含有寒冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现，建议进行交叉配血试验操作时室温保持在22°C左右，不同的凝聚胺试剂盒操作方法各不相同，实验时请严格按照说明书操作。离心后结果观察注意事项，将试管呈30-45°C角拿在手上，细胞扣朝上，手腕轻轻用力，用液体去冲细胞扣，如果为阴性，则细胞成细沙状沿试管壁流下，如果为阳性，细胞呈块状脱落细胞壁或呈齿状沿试管壁留下。切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，弱凝集则会误判为阴性[3]。
2结果
3讨论
盐水法原理：盐水介质中红细胞上的抗原决定族与相应抗体分子上的抗原结合位点结合，交叉连接形成肉眼可见的凝集块。盐水介质凝集试验用于IGM抗体的检出、鉴定、盐水配血试验以及用盐水抗体鉴定的血型抗原，如ABO、MN、P等血型系统的抗原。当IGG抗A、抗B的浓度足够大时，在盐水介质里也能与相应的红细胞发生凝集反应。
盐水法只能检出不相配合完全抗体，不能检出不相配合的不完全抗体[4]。
凝聚胺交叉配血法的原理：凝聚胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐，溶解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷，有利于红细胞凝聚，低离子强度溶液也能降低红细胞的Zeta电位，可进一步增加抗原抗体间的吸引力。当血清中存在IGM或IGG类血型抗体时，与红细胞发生紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胺的正电荷，使IGM或IGG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开；如果血清中不存在IGM或IGG类血型抗体，加入解聚液可使非特异性凝集消失[5]。
该法提高了凝集反应的速度，使原来在盐水介质中不能凝集RBC的抗体发生凝集，提高反应灵敏度。用此法可以检查出能引起溶血性输血反应的几乎所有规则与不规则抗体，适合于各类输血病人的配血，目前此法已被广泛应用，在一定程度上取代了传统的盐水测定法[6]。
通过17例标本血清抗体效价的测定，凝聚胺法的灵敏度较盐水法的灵敏度高1-5个滴度。凝聚胺法的检出率为70.6%，盐水介质配血法的检出率为52.9%，两组对比具有统计学差异（P<0.05）。凝聚胺法反应较盐水法灵敏度高，能检测几乎所有规则与不规则血型抗体，适用于各类输血患者的配血，值得临床广泛应用。
参考文献：
[1]赵修凤，尤崇革.凝聚胺检测技术在交叉配血中的应用[J].兰州医学院学报，2003，29（4）：4445.
[2]马利平，张建国.凝聚胺试验在交叉配血中的应用[J].济宁医学院学报，2005，28（2）：62
[3]姜华，李晓艳.影响凝聚胺交叉配血结果的4种药物[J].实用医药杂志，2004，21（1）：26.
[4]潘纪春，欧阳锡林，陈民才.盐水法与聚凝胺交叉配血试验比较[J].第四军医大学学报，2005，26（7）：606607.
[5]王雪明，虞秀兰，刘冬梅.盐水法试验交叉配血在临床输血中的应用[J].临床检验杂志，2005，23（4）：813814.
[6]莫少珠，袁汉尧，戴湘春，等.凝聚胺法交叉配血978例观察[J].广东医学院学报，1999，17（3）：255256.
关键词：凝聚胺技术；临床输血；检验；重要性；应用途径
中图分类号：R826.2+6 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2013）3-026-02
随着临床医学的发展，输血在医学和抢救中起着极为重要的作用。输血有治疗和抢救生命的作用，同时会产生有害的作用，如何发挥输血的有效治疗作用，预防其有害作用，保证输血安全，是临床输血的重要课题。
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间[1]。
交叉配血实际上是检查不配合性，使病人，献血者血液之间没有可测到的不相配合的抗原，抗体成分，试验应在37°C下进行。试验方法除作盐水介质外，还有抗球蛋白试验法、酶法、凝聚胺法或其改良法。在配血的任何步骤中均不产生溶血或凝集鲜血者的血液才能给予病人输注[2]。
本文为了探讨凝聚胺技术在临床输血检验中的重要性和应用价值，做一系列研究，现报告如下：
1材料和方法
1.1试剂和器材：凝聚胺试剂盒；生理盐水；小试管；滴管；试管架；记号笔；显微镜；离心机。
1.2操作：供受者红细胞用生理盐水配成3-5%的细胞悬液。加样量均为：血清100微升，红细胞悬液50微升。取试管两支，表明主侧次侧，主侧管加受血者血清（血浆）1滴，和供血者3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管受血者3-5%红细胞悬液加供血者血清（血浆）1滴。各加LIM溶液3滴，混合均匀后，再各加凝聚胺溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟或参照说明书，普通离心机1000转离心15秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1液体。轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。最后加入凝聚胺2滴，轻轻转动试管混匀并同时观察结果。
1.3结果判定：如果在30秒内（或按说明书）凝集散开，代表是由凝聚胺引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不想合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
1.4注意事项：可以用EDTA抗凝血浆代替血清使用；若受血者血清含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴凝聚胺溶液以中和肝素；试剂使用前请放置至室温平衡后再行操作。在冬天室温极低的情况下进行交叉配血试验操作，由于某些受血者血清中可能含有寒冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现，建议进行交叉配血试验操作时室温保持在22°C左右，不同的凝聚胺试剂盒操作方法各不相同，实验时请严格按照说明书操作。离心后结果观察注意事项，将试管呈30-45°C角拿在手上，细胞扣朝上，手腕轻轻用力，用液体去冲细胞扣，如果为阴性，则细胞成细沙状沿试管壁流下，如果为阳性，细胞呈块状脱落细胞壁或呈齿状沿试管壁留下。切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，弱凝集则会误判为阴性[3]。
2结果
3讨论
盐水法原理：盐水介质中红细胞上的抗原决定族与相应抗体分子上的抗原结合位点结合，交叉连接形成肉眼可见的凝集块。盐水介质凝集试验用于IGM抗体的检出、鉴定、盐水配血试验以及用盐水抗体鉴定的血型抗原，如ABO、MN、P等血型系统的抗原。当IGG抗A、抗B的浓度足够大时，在盐水介质里也能与相应的红细胞发生凝集反应。
盐水法只能检出不相配合完全抗体，不能检出不相配合的不完全抗体[4]。
凝聚胺交叉配血法的原理：凝聚胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐，溶解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷，有利于红细胞凝聚，低离子强度溶液也能降低红细胞的Zeta电位，可进一步增加抗原抗体间的吸引力。当血清中存在IGM或IGG类血型抗体时，与红细胞发生紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胺的正电荷，使IGM或IGG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开；如果血清中不存在IGM或IGG类血型抗体，加入解聚液可使非特异性凝集消失[5]。
该法提高了凝集反应的速度，使原来在盐水介质中不能凝集RBC的抗体发生凝集，提高反应灵敏度。用此法可以检查出能引起溶血性输血反应的几乎所有规则与不规则抗体，适合于各类输血病人的配血，目前此法已被广泛应用，在一定程度上取代了传统的盐水测定法[6]。
通过17例标本血清抗体效价的测定，凝聚胺法的灵敏度较盐水法的灵敏度高1-5个滴度。凝聚胺法的检出率为70.6%，盐水介质配血法的检出率为52.9%，两组对比具有统计学差异（P<0.05）。凝聚胺法反应较盐水法灵敏度高，能检测几乎所有规则与不规则血型抗体，适用于各类输血患者的配血，值得临床广泛应用。
参考文献：
[1]赵修凤，尤崇革.凝聚胺检测技术在交叉配血中的应用[J].兰州医学院学报，2003，29（4）：4445.
[2]马利平，张建国.凝聚胺试验在交叉配血中的应用[J].济宁医学院学报，2005，28（2）：62
[3]姜华，李晓艳.影响凝聚胺交叉配血结果的4种药物[J].实用医药杂志，2004，21（1）：26.
[4]潘纪春，欧阳锡林，陈民才.盐水法与聚凝胺交叉配血试验比较[J].第四军医大学学报，2005，26（7）：606607.
[5]王雪明，虞秀兰，刘冬梅.盐水法试验交叉配血在临床输血中的应用[J].临床检验杂志，2005，23（4）：813814.
[6]莫少珠，袁汉尧，戴湘春，等.凝聚胺法交叉配血978例观察[J].广东医学院学报，1999，17（3）：255256.