【摘 要】
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目的利用树突状细胞CAL-1的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)检测平台，以进一步应用于抑制性寡聚脱氧核苷酸的筛选。方法以含有未甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸CpG(CpG ODN) 0800 (3 μg/ml)作为刺激剂，将其作用CAL-1细胞(2×105个细胞/孔)，48 h后收集上清，作用于L929细胞(2×104个细胞/孔)。培养18 h，加入水疱性口炎病毒(VSV)，培养72 h，检测57
【机 构】
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130033 长春，吉林大学中日联谊医院科学研究中心,130021 长春，吉林省疾病预防控制中心,130021 长春，吉林大学第一医院生殖中心,130033 长春，吉林大学中日联谊医院胸外科,1300
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目的利用树突状细胞CAL-1的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)检测平台，以进一步应用于抑制性寡聚脱氧核苷酸的筛选。
方法以含有未甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸CpG(CpG ODN) 0800 (3 μg/ml)作为刺激剂，将其作用CAL-1细胞(2×105个细胞/孔)，48 h后收集上清，作用于L929细胞(2×104个细胞/孔)。培养18 h，加入水疱性口炎病毒(VSV)，培养72 h，检测570 nm处的吸光度值。
结果筛选条件确定为CpG ODN 0800终质量浓度为3 μg/ml，CAL-1上清液1∶5倍稀释。L929细胞数在2×104个细胞/孔，反应时间为24 h。应用此条件成功筛选出自行设计的抑制性ODN-SAT05f。
结论建立实验体系，成功检测了自行设计的抑制ODN和CpG ODN诱导的CAL-1细胞的TNF-α的生物学活性。
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