【摘 要】
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目的研究树突状细胞(DC)融合疫苗与细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)共培养对人胃癌细胞凋亡的影响。方法采集胃癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)提取诱导生成DC和CIK细胞。聚乙二醇
【机 构】
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湖南省长沙市第四医院消化内科,中南大学湘雅医院消化内科
【基金项目】
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湖南省卫生计生委科研计划课题B类项目(编号:B2016221)
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目的研究树突状细胞(DC)融合疫苗与细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)共培养对人胃癌细胞凋亡的影响。方法采集胃癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)提取诱导生成DC和CIK细胞。聚乙二醇法融合DC与自体胃癌细胞成为融合疫苗。实验分为3组:DC融合疫苗组(简称融合组)、DC组和胃癌组。3组细胞分别与CIK细胞混合培养,流式细胞仪检测CIK细胞亚群CD3~+CD8~+和CD3~+CD56~+细胞表达率。胃癌细胞与3组混合细胞作用后采用Annexin V-FITC/PI染色法观察和检测其凋亡率。Western blot法检测Raf激酶抑制蛋白(RKIP)、NF-κB、Caspase-8蛋白表达。结果胃癌细胞与DC的融合率为26.2﹪,融合DC较未融合DC高表达CD80和CD86(t=74.11、91.84,P<0.05)。与DC组和胃癌组相比,融合组CIK细胞CD3~+CD8~+和CD3~+CD56~+细胞表达率增加(F=60.29、28.68,P<0.05);融合组胃癌细胞凋亡率增加,RKIP、Caspase-8蛋白相对含量表达上调,而NF-κB蛋白相对含量表达下调(F=52.63、21.05、29.89、101.58,P<0.05)。结论DC融合疫苗与CIK细胞共培养后能促进CIK细胞成熟,可能通过上调RKIP、抑制NF-κB从而上调Caspase-8,促进胃癌细胞凋亡,起到抗肿瘤效应。
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