【摘 要】
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本研究克隆了甘蓝型油菜线粒体功能未知基因ORF117,构建了带有线粒体转运信号肽序列(TP)的植物过表达载体35S∷TP-ORF117、35S∷TP-EGFP和35S∷TP-ORF117-EGFP,转化野生型拟
【机 构】
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湖北大学生命科学学院,中国农业科学院
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本研究克隆了甘蓝型油菜线粒体功能未知基因ORF117,构建了带有线粒体转运信号肽序列(TP)的植物过表达载体35S∷TP-ORF117、35S∷TP-EGFP和35S∷TP-ORF117-EGFP,转化野生型拟南芥并进行抗除草剂筛选,共获得纯合的转基因拟南芥株系62个。qPCR表明,ORF117在转基因材料中得到高效过表达。用转35S∷TP-EGFP、35S∷TPORF117-EGFP拟南芥制备原生质体,经线粒体特异染料染色,在激光共聚焦显微镜下做线粒体、GFP共定位检测,GFP蛋白和ORF117-EGFP融合蛋白被准确定位到了线粒体。
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