【摘 要】
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根据GenBank公布的甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因序列,合成HA全长基因,构建原核表达载体pET-30 Xa/LIC-HA。阳性质粒转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。对表达蛋白进行SDS
【机 构】
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河南师范大学; 郑州职业技术学院; 郑州大学; 河南省生物工程技术研究中心;
【基金项目】
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河南省工程技术中心专项经费项目(102102313105);郑州市重大科技专项计划(093SGBS22027)
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根据GenBank公布的甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因序列,合成HA全长基因,构建原核表达载体pET-30 Xa/LIC-HA。阳性质粒转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blot检测的结果表明,HA基因获得表达,产物具有免疫学活性,分子质量约64 ku,以包涵体形式存在。以纯化的重组蛋白作为抗原初步建立了双抗原夹心检测甲型H1N1流感HA抗体的胶体金方法。该方法能检测出甲型H1N1流感阳性血清,为疫苗效果的评价奠定了基础。
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