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对比了C18柱和HILIC色谱柱对L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸的分离效果。进一步考察了在HILIC模式下的流动相组成、柱温和流速对分离L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸的影响。实验结果表明:检测波长为245 nm,流动相为0.1%磷酸+2 g/L甲酸铵-乙腈(10/90,V/V),流速为0.8 m L/min,柱温为20℃条件下分离效果最佳,分离度为4.60。采用该方法对三种食品中的L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸含量进行测定,三种样品中均有L-抗坏血酸和D-异抗坏血酸检出,含量均在20.59~184.37 mg/100 g之间,相对标准偏差在0.65%~1.41%之间。