【摘 要】
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目的:建立适合微生物发酵体系硫酸化多糖的测定方法.方法:以代表性的硫酸化多糖——硫酸软骨素(CS)为对象,以二甲基亚甲基蓝(DMMB)法为基础,考察了测定波长、反应时间、体系p
【机 构】
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东华大学化学化工与生物工程学院,上海201620;华东师范大学生命科学学院,上海200241
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目的:建立适合微生物发酵体系硫酸化多糖的测定方法.方法:以代表性的硫酸化多糖——硫酸软骨素(CS)为对象,以二甲基亚甲基蓝(DMMB)法为基础,考察了测定波长、反应时间、体系pH值、培养基组分、多糖及蛋白等对该方法的影响.用氯化钡-明胶法测定硫酸根含量,以对DMMB法进行验证.结果:DMMB法最适测定波长为525 nm,反应时间为0～5 min,体系的pH值为3.0.培养基组分及蛋白质对结果影响不显著(P＞0.05).DMMB法能测定硫酸化的糖胺聚糖肝素和硫酸软骨素,而对非硫酸化糖胺聚糖透明质酸不响应.DMMB法测定硫酸化多糖和氯化钡-明胶法测定硫酸根相关性较好(R2＞0.99),且DMMB法操作简单.结论:DMMB法可用于测定微生物发酵体系硫酸化多糖,且简便快速.
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