【摘 要】
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阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine 2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU
【机 构】
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西南大学农业部蚕桑学重点开放实验室,云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划“973”项目(编号2005CB12-1000),国家高技术研究发展计划“863”项目(编号2006,AA10A117),国家自然科学基金项目(编号30771630).
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阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine 2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU2、BraN和草地贪夜蛾卵巢细胞Sf21进行了外源DNA质量、脂质体用量、转染细胞密度和转染孵育时间等4个转染条件的优化实验,筛选到了阳离子脂质体转染效率最高的细胞系BmN-SWU1。BmN-SWU1细胞的最佳转染条件为:外源DNA 0.6μg,脂质体2.5μL,细胞密度1×10^5m
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