【摘 要】
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目的 探讨重组人干扰素α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)对膀胱肿瘤细胞的直接效应及其作用机制.方法 采用体外实验,将重组hIFN-α-2b-BCG直接作用于小鼠膀胱癌MB-49细胞,荧光染
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目的 探讨重组人干扰素α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)对膀胱肿瘤细胞的直接效应及其作用机制.方法 采用体外实验,将重组hIFN-α-2b-BCG直接作用于小鼠膀胱癌MB-49细胞,荧光染色后,在光镜和电镜下观察细胞的变化.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞仪(FCM),检测野生型BCG和重组hIFN-α-2b-BCG对MIM9细胞的影响.结果 重组hIFN-α-2b-BCG与MB49细胞共培养后,光镜下见肿瘤细胞变圆,增殖速度明显减缓,部分细胞脱壁,胞浆呈大量空泡和颗粒状.透射电子显微镜下可见肿瘤细胞表面微绒毛脱落,细胞质坏死,大量空泡,细胞表面有出泡现象.吖啶橙染色后,在荧光显微镜下可见肿瘤细胞聚集成团状的细胞球体,胞突消失,凋亡小体出现.Hoechst33258染色后,可见大量肿瘤细胞呈明亮的蓝色荧光.MTT测定结果显示,随共培养时间延长,重组hIFN-α-2b-BCG可不同程度抑制肿瘤细胞的生长,抑制率高于野生BCG.FCM检测结果显示,24 h后野生型BCG诱导凋亡率为10.8%,重组hIFN-α-2b-BCG诱导凋亡率为19.7%;48 h后野生型BCG诱导凋亡率为20.9%,重组hIFN-α-2b-BCG诱导凋亡率为46.6%.两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).重组hIFN-α-2b-BCG上调MB49细胞MHC-Ⅰ表达,具有时间依赖性,且上调比例明显高于野生型BCG(P＜0.01).结论 重组hIFN-α-2b-BCG成功诱导肿瘤细胞凋亡,有更高的调节免疫原性、抗肿瘤作用和细胞毒性.
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