青海湖裸鲤体外肝胰细胞原代与传代培养

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采用组织块移植培养技术,分别用DMEM和RPM11640培养基对青海湖裸鲤肝胰组织细胞进行原代培养。培养48h组织块周围有细胞迁出,并形成生长晕。培养一周可形成单层细胞。对原代培养的单层细胞用胰蛋白酶-EDTA消化后,传代培养至第四代。确立青海湖裸鲤肝胰细胞培养条件为:培养基为DMEM,培养温度为27℃,pH值为7.0—7.5,原代培养血清浓度为20%,传代培养的血清浓度为10%,无需通入CO2和添加细胞生长因子。
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