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目的:探讨小檗碱对HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）模型的改善作用及机制。方法:HepG2细胞采用高糖(25 mmol·L-1)和高胰岛素(1×10-6mol·L-1)联合诱导24 h,建立体外IR模型。模型培养液中分别加入1×10-5,1×10-6mol·L-1小檗碱,设1×10-3mol·L-1二甲双胍作为阳性药,孵育24 h。葡萄糖氧化酶法检测培养液葡萄糖含量,计算细胞葡萄糖消耗量,细胞增殖活性检测（CCK-8）测定细胞增殖活性;生化法检测细胞丙酮酸激酶（PK）活性,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞葡萄糖激酶（GCK）和葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）的活性;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞胰岛素受体（InsR）,磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B（Akt）和GLUT2 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞胰岛素受体底物-1（IRS-1）,磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶（p-PI3K）和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B（p-Akt）的表达水平。结果:与正常组比较,模型组细胞葡萄糖消耗量显著降低（P<0.01）,PK,GCK,GLUT2蛋白活性显著降低（P<0.01）,InsR,PI3K,Akt,GLUT2 mRNA表达水平显著降低（P<0.01）,IRS-1,p-PI3K,p-Akt蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。与模型组比较,小檗碱组和二甲双胍组的细胞葡萄糖消耗量明显增加（P<0.01）,PK,GCK,GLUT2蛋白活性显著升高（P<0.01）,InsR,PI3K,Akt,GLUT2 mRNA和IRS-1,p-PI3K,p-Akt1蛋白表达水平均明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论:小檗碱体外对HepG2细胞IR模型有显著的改善作用,其机制可能通过调节IRS-1/PI3K/Akt信号通路促进肝脏葡萄糖转运和改善葡萄糖代谢。