本文建立了一种利用紫外高效液相法（HPLC-UV）测定植物甾醇中菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇的方法。采用Waters Symmetry^?C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈和水为流动相等度洗脱,柱温35℃,流速1.0 mL/min,紫外检测波长为208 nm。实验结果表明:菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇在38 min内均能实现基线分离,线性范围分别为2.52～50.30μg/m L,5.08～101.60μg/m L,5.10～102.00μg/m L时,甾醇单体的线性关系良好,相关系数r分别为0.9971,0.9989,0.9991,检测限为2.5μg/m L;日内精密度在0.06%～3.06%范围内,日间精密度介于1.56%～6.61%;加样回收率介于92.74%～106.25%之间。本方法能够准确测定4种植物甾醇中3种甾醇单体的含量,其中大豆甾醇和木甾醇中3种甾醇单体的含量组成差异较大,大豆甾醇中菜油甾醇和豆甾醇的含量分别为（163.80±2.04～251.23±5.11） mg/g和（134.89±1.84～235.04±8.94）mg/g,远高于木甾醇中的菜油甾醇和豆甾醇含量,而木甾醇中β-谷甾醇含量约为（685.10±7.55）mg/g,则明显高于β-谷甾醇在大豆甾醇中的含量。相对现有的高效液相方法,本方法实现了对混合甾醇中菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇3种甾醇单体的精确定量分析。