【摘 要】
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目的构建含蛋白转导结构域(PTD)与慢性粒细胞白血病(CML)bcr/abl融合基因片段的质粒,并在大肠杆菌中表达.方法 PCR扩增的CML bcr/abl基因片段,经DNA测序后,与合成编码PTD的DN
【机 构】
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第四军医大学唐都医院血液科,第四军医大学遗传与发育生物学教研室
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目的构建含蛋白转导结构域(PTD)与慢性粒细胞白血病(CML)bcr/abl融合基因片段的质粒,并在大肠杆菌中表达.方法 PCR扩增的CML bcr/abl基因片段,经DNA测序后,与合成编码PTD的DNA片段一起插入质粒pET-16b,构建表达载体pEPb,转化大肠杆菌并进行了PTD-bcr/abl蛋白的诱导表达和纯化.结果跨越bcr/abl断裂点的523 bp的目的片段被有效地扩增.DNA序列分析表明所构建的含PTD-bcr/abl融合基因的质粒与设计相同.PTD-bcr/abl融合蛋白在转化大肠杆菌获得了高效表达并纯化.结论成功地获得了PTD-bcr/abl融合蛋白片段的基因表达产物,为进一步研究CML的免疫治疗奠定了基础.
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