蓖麻蚕乙酰胆碱酯酶基因Pcrace2的克隆及序列与表达分析

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昆虫乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标.利用RT-PCR和RACE技术从蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini)幼虫头部组织克隆了乙酰胆碱酯酶基因Pcrace2.该基因cDNA全长为2 051 bp,包含1 497 bp的ORF,编码498个氨基酸,蛋白质的分子质量为56.25 kD,等电点(pI)为5.11,含有由23个氨基酸组成的前体信号肽,推测为分泌型蛋白质.基于PcrAChE2同源氨基酸序列的系统进化分析表明:蓖麻蚕与小菜蛾(Plutella xylostella)、棉铃虫(Helicoverpa armigera)、烟青虫(Helicoverpa assulta)的亲缘关系最近,与家蚕(Bombyx mori)和野桑蚕(Bombyx mandarina)的亲缘关系也比较近.利用Real-time PCR方法分析Pcrace2基因在蓖麻蚕5龄第3天幼虫的头部、脂肪体、丝腺、中肠和血液中均有表达,以头部的表达量最高;在蓖麻蚕不同发育时期,Pcrace2在蛾期的表达量明显高于其它发育时期,在5龄幼虫期的表达量最低.研究结果有助于进一步分析蓖麻蚕乙酰胆碱酯酶基因的功能.
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