【摘 要】
：
为研究出生至4周龄每天口服107CFU母乳链球菌对新生小鼠的影响,需要制备在-80℃冻存4周、解冻后仍有至少1á×109 CFU/mL活菌的菌悬液.前期分离到人母乳链球菌Streptococus salivarius F286和S.parasanguinis F278.S.salivarius F286和 S.parasanguinis F278在 M17液体培养基厌氧生长至平台期时,活菌浓度高于1×109CFU/mL,分别用M17、M17+10％脱脂牛乳、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、PBS+10％脱脂牛乳
【机 构】
：
上海交通大学系统生物医学研究院,系统生物医学教育部重点实验室,上海,200240;上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海,200240;上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国
论文部分内容阅读
为研究出生至4周龄每天口服107CFU母乳链球菌对新生小鼠的影响,需要制备在-80℃冻存4周、解冻后仍有至少1á×109 CFU/mL活菌的菌悬液.前期分离到人母乳链球菌Streptococus salivarius F286和S.parasanguinis F278.S.salivarius F286和 S.parasanguinis F278在 M17液体培养基厌氧生长至平台期时,活菌浓度高于1×109CFU/mL,分别用M17、M17+10％脱脂牛乳、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、PBS+10％脱脂牛乳将平台期的 S.salivarius F286和 S.parasanguinis F278制成不浓缩或5倍浓缩的菌悬液,-80℃冻存4周后,只有PBS+10％脱脂牛乳制备的5倍浓缩的S.salivarius F286菌悬液和M17制备的S.parasanguinis F278菌悬液解冻后活菌数量始终高于1×109 CFU/mL.因为化学成分复杂的M17培养基可能影响动物的代谢和免疫,因此用含有PBS、10％脱脂牛乳和链球菌的菌悬液口饲动物.仔鼠出生后1～14 d,每天口饲解冻的、含有107CFUS.salivariusF286的PBS+10％脱脂牛乳菌悬液,或者新鲜制备的、含有107 CFU S.parasanguinis F278的PBS菌悬液以及等体积20％脱脂牛乳,仔鼠成活率约为83％(其余仔鼠死于母鼠拒绝喂养),说明107 CFU的S.salivarius F286或S.parasanguinis F278不会引起仔鼠感染死亡.本研究中,我们比较不同方法制备的菌悬液在-80℃冻存后细菌的存活量,确定最优的菌悬液制备方法,并评估细菌对仔鼠成活率的影响,确定了两株母乳链球菌的生物安全性,本实验流程对制备和保存用于灌胃/口饲动物的其他种类细菌的菌悬液具有借鉴意义.
其他文献
粟酒裂殖酵母是优秀的研究线粒体模型机理的模式生物.为建立适合粟酒裂殖酵母的指示线粒体形态的荧光标签,本研究以pYJ19质粒为骨架,构建了由粟酒裂殖酵母nmt41启动子控制的、以增强型绿色荧光EGFP为报告基因、以粟酒裂殖酵母自身蛋白Cox4为线粒体定位序列(Mitochondrial targeting sequences)来源的mts和以leu1营养为选择标记的质粒系统pMTS7.将pMTS7转化粟酒裂殖酵母yHL6381,以Mito-Tracker线粒体染料为对照,荧光显微镜观察结果发现,pMTS7能
为了对黑安格斯牛肉质性状关键调控基因进行筛选,本研究分别以3头24月龄的黑安格斯牛和西门塔尔牛背最长肌为试验材料,在运用Illumina HiSeqTM技术对所有样品进行转录组测序后利用生物信息学方法和相关软件对测序结果进行归类分析.通过分析得到黑安格斯牛与西门塔尔样本间的差异表达基因有409个,其中上调基因115个,下调基因294个.进一步分析发现与肉质性状相关的基因PARD表达量在黑安格斯中显著高于西门塔尔(P＜0.01),对此运用RT-qPCR技术进行验证得到的实验结果与转录组结果一致.这些研究结果
为了解水稻根系微生物群落间的差异,比较水稻根内、根表以及根际3个生态位微生物群落组成差异;探究水稻根系生态位之间、变化种群间的相互关系;以期为今后水稻根系微生物研究提供具有参考价值的依据.本研究利用WGCNA算法对水稻根系3个生态位的微生物群落数据分别构建共表达网络,找出根内、根表以及根际微生物群落间的差异网络,以网络为单位比较分析不同生态位间微生物群落的差异,并基于共变化网络分析进一步探究差异种群间的相互关系.通过WGCNA算法对水稻根系3个生态位的微生物群落进行共表达网络分析,结果发现:在水稻根内-根
本研究以褐藻酸钠为唯一碳源,从广西茅尾海采集的海藻和海水样品中分离获得了10株高产褐藻胶裂解酶(Alginate lyase)的菌株,经过16S rDNA系统发育分析,初步确定这些菌株分别属于盐单胞菌属、假交替单胞菌属和弧菌属.为进一步了解褐藻胶裂解酶(ALG)功能基因的进化轨迹,本研究从GenBank收集了alg基因的同源序列.通过系统发育分析和极大似然分析,运行位点模型和分支位点模型进行了计算,确定该基因存在正选择现象.正选择进化分析结果表明4Y、16I、40N、61L、91T、99S、149L和15
(R,R)-2,3-BD是一种重要的四碳平台化合物,在液晶材料、高附加值手性化合物,尤其是不对称合成光学纯药物等方面有天然优势.将来源于多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)DSM 365的α-乙酰乳酸合成酶(α-acetolactate synthase)基因 alsS、α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase)基因alsD和(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶(2,3-butanediol dehydrogenase)基因R,R-bdh与表达载体p
细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,bR)是一种光驱受体蛋白,每个活性单元由3个单体组成,每个单体由一分子视蛋白和一分子的视黄醛发色团共价结合而成,其功能为从胞内向胞外定向传输质子,利用形成的质子浓度梯度将光能转化为化学能.光照后视黄醛发色团构型发生all-trans向13-cis转变,蛋白的构象也随之发生了一系列具有稳定中间态的变化并驱动质子的定向传递.为探讨bR视黄醛键合区保守性氨基酸色氨酸86 (Tryptop-han86,w86)对其光循环中间态和质子泵功能的影响,本研究采用定点突变
本研究以铜山烟草(中烟100)生产田根际土壤为材料,通过以支链淀粉作为碳源的固体鉴别培养基的分离培养获得3株产淀粉脱支酶菌株,将其依次编号为XUEX1、XUEX2和XUEX3,采用DNS法测定了3株菌的产酶活性,经过32h的连续发酵,XUEX3菌株的酶活性峰值达到了16.3 U/mL,XUEX1和XUEX2的峰值均未超过9 U/mL.选取产酶活性最高的XUEX3作为出发菌株进行紫外线诱变选育.结果 表明,试验获得的3个正突变菌株XUEX3-1、XUEX3-2和XUEX3-3的产淀粉脱支酶活性与出发菌株相比
为了解安徽地区猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学及流行毒株遗传变异情况,本研究应用DNA Star软件,针对22株PCV2安徽分离株和26株GenBank登录的PCV2参考毒株,进行全基因组核苷酸序列、ORF1和ORF2核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性分析,并运用MEGA 6.0软件构建系统进化树.结果显示,22株PCV2安徽分离株基因组全长均为1 767 bp,相互之间的核苷酸序列相似度为94.6％～99.8％,与GenBank登录的26株PCV2参考毒株之间的核苷酸序列相似度为92.4％～
为了获得木瓜酵素生物活性的相关情况,本研究从木瓜酵素化学成分含量、功效酶活力和抗氧化活性3个方面进行探究.结果 显示,总糖、总酚、总黄酮和蛋白质的含量分别为(3090.00±193.25)、(161.67±4.62)、(55.00±1.00)、(134.67±1.15) mg/L;淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶和总超氧化歧化酶(T-SOD)活力分别为(0.09±0.026)、(7.11±1.08)、(0.64±0.127)、(67.68±2.244) U/mL.木瓜酵素对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)
木质纤维素转化成燃料酒精是缓解能源和环境危机的途径之一.降低将木质纤维素转化成生物燃料的生产成本,需要提高纤维素酶产量或筛选到具更高酶活性的纤维素酶.新鞘氨醇杆菌(Genus Novosphin-gobium)属于鞘氨醇杆菌科(Sphingomonads),该科的细菌新陈代谢多样化,能够降解有机化合物,也可应用于木质素的降解,但目前新鞘氨醇杆菌属细菌的纤维素酶基因的研究未见报道.本研究对新鞘氨醇杆菌属细菌菌株9-1的纤维素酶基因Nspcel8A进行了克隆表达和酶学特性鉴定.Nspcel8A含有属于糖基水解