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前言
碘伏是在我们日常生活中和医院常用的一类消毒剂，具有广谱杀菌作用，可杀灭细菌繁殖体、真菌、原虫和部分病毒。一般用于皮肤黏膜的消毒，按不同的浓度可用于烫伤、阴道炎、器械浸泡的消毒等。本次实验是以碘和C12-18脂肪醇聚氧乙烯醚络合物为主要成分的消毒剂，有效碘含量为4.0g/L-5.0g/L。我们采用了悬液定量杀菌法进行实验，来观察本品的杀菌效果，结果报告如下。
1.材料与方法
1.1材料
1.1.1材料和设备 碘伏络合剂、中和剂（1%硫代硫酸钠+1%吐温-80的TSB溶液）【1】、胰蛋白胨生理盐水溶液（以下简称TPS）、胰蛋白胨大豆琼脂培养基（以下简称TSA）、胰蛋白胨肉汤培养基（以下简称TSB）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（以下简称SDA）、沙氏葡萄糖液体培养基（以下简称SDB）恒温水浴锅、生物安全柜、移液枪
1.1.2 试验菌株大肠埃希菌（CMCC（B）44102）、白色念珠菌（CMCC（F）98001）、金黄色葡萄球菌（CMCC（B）26003）以上菌种均来自北京三药科技开发公司。
1.2 方法
1.2.1工作菌液制备 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌冻存菌分别接种到100ml的TSB中，在33℃培养箱中培养18h-24h观察生长状态;取白色念珠菌冻存菌接种到100ml的SDB中，在25℃培养箱中培养24h-36h观察生长状态。生长状态良好的菌，放入4℃冰箱中，备用。
1.2.2 试验菌悬液的制备 将备用的工作菌液取出，细菌接种到100ml的TSB中，在33℃培养箱中培养18h-24h;真菌接种到100ml的SDB中，在25℃培养箱中培养24h-36h。将菌液进行活菌计数，并用TPS稀释液稀释配制成含菌量为1×108～5×108cfu/ml。
1.2.3中和剂鉴定试验【2】 将碘伏消毒剂稀释到有效碘含量为2.0g/L-2.5g/L。试验菌悬液、培养基（细菌用TSA培养基、真菌用SDA培养基）、培养时间不同外，其他试验条件均相同。试验组如下。
试验结果符合符合以下全部条件，所测中和剂可判为合格：第1组无试验菌，或仅有极少数试验菌菌落生长;第2组较第1组为多，但较第3、4、5组为少的试验菌菌落生长。3、4、5 组菌数在 1×107 ～ 5×107cfu/ml之间，且组间菌数误差率≦15%;第6组无菌生长，连续3次重复试验结果一致，表明使用中和剂及其使用浓度适宜【2】。实验结果见表1。
1.2.4悬液定量杀菌试验【2】 取0.5ml菌液加入4.5mlTPS稀释液中将菌悬液浓度稀释到1×108 ～ 5×108cfu/ml之间（实际稀释到1×107 ～ 5×107cfu/ml）。消毒剂的浓度为2.0g/L-2.5g/L。试验菌悬液、培养基（细菌用TSA、真菌用SDA）、培养时间不同外，其他试验条件均相同。实验分组如下。
（1）取0.5ml试验菌悬液加入4.5ml的碘伏溶液中分别作用30s、60s、90s，取出0.5ml反应液加到4.5ml的中和剂中，作用10min，取1.0ml接种培养（细菌33℃培养18h-24h，真菌25℃培养24h-36h），每个时间段平行两组。
（2）阳性对照组：用TPS稀释液代替碘伏消毒剂，进行平行试验，平行两组。
（3）取0.5ml试验菌液于平皿中，倒入同批次的培养基进行培养，观察菌落生长状态。
（4）取0.5ml试验菌液到4.5ml的中和剂中，混匀。取1.0ml接种到培养基中培养，观察中和剂中的生长状态。
（5）大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌在33℃培养18h-24h观察;白色念珠菌在25℃培养24h-36h观察。
（6）计算各组的活菌浓度（cfu/ml），换算为对数值（N），并按下式计算杀灭对数值：
杀灭对数值（KL）=对照组平均活菌浓度的对数值（No）-实验组活菌浓度的对数值（Nx）
试验结果见表2。
2.结果
2.1中和剂鉴定试验结果
中和剂鉴定实验结果表明，用含有1%的硫代硫酸钠、1%的吐温-80的TSB溶液做中和剂，其结果符合中和剂的测试结果判定：1组无菌生长;2组生长菌落远高于1组菌落;3组，4组，5组间菌数误差率等于11.95%。所以可用1%的硫代硫酸钠、1%的吐温-80的TSB溶液做中和剂来进行定量杀菌试验。
2.2 悬液定量杀菌试验结果
试验结果表明，用含有效碘4.0g/L-5.0g/L的碘伏消毒液对悬液内大肠埃希菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌不同作用时间的平均杀灭对数分别为7.26，6.05，7.23。
3. 讨论
消毒是切断传染病和感染性疾病传播途径的重要手段，其中化学消毒剂的使用是最简便、最普遍、也是最有效的方法之一，但每次重大传染病流行期间化学消毒剂是使用最多的，很多人对于消毒剂的选择也是盲目的。林立旺等提出疫情防控的消毒剂应具备有效、供应量大、廉价、使用方便、相对毒性较小等特点，不具有这些特点的可不予考虑。符合这些特点的消毒剂一般有过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯、含氯消毒剂和酒精，但是酒精可以用于局部消毒，因属于易燃易爆所以不可以大面积喷洒，也不建议用于口罩表面消毒，会导致口罩降低或丧失过滤效果，碘类消毒剂则更多用于皮肤黏膜的消毒【5】。
碘伏是一种碘与表面活性剂为载体和助溶剂而形成的不定型络合物，单方碘类消毒剂主要有聚醇醚碘和聚维酮碘两大类为主。聚维酮碘是聚乙烯吡咯烷酮与碘的络合物，聚维酮碘是唯一被中国、英国、美国和日本等国药典收载，并准许用于医疗卫生和人体消毒的碘伏。聚维酮碘对皮肤刺激性小，毒性低，作用持久，使用安全简便。聚醇醚碘是以壬基酚聚氧乙烯醚或脂肪醇聚氧乙烯醚作为载体与碘络合而成的碘伏消毒液。试验证明，聚醇醚碘的化学稳定性优于聚维酮碘【6】。
在本次实验中的碘伏为碘和C12-18脂肪醇聚氧乙烯醚络合物为主要有效成分的消毒液，在实验中该碘伏在30s和90s对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的杀灭效果无差异。实验得出该碘伏对细菌和真菌都具有较强的杀灭能力。
参考文献
[1] 唐晨晨，孙巍，王玲，张伟，汪歆悦.常用碘伏制品的殺菌性能研究.江苏预防医学，2019，30（1）：13-14.
[2] 卫生部卫生法制与监督司.消毒技术规范[M].北京，中华人民共和国卫生部.2002：126-132.
[3] 张海林.对比碘伏、苯扎溴铵应用于清创中的临床效果.特别健康，2018，（19）：96-97.
[4] 彭仙，涂方为.碘伏在复发性霉菌性阴道炎中的应用.中国继续医学教育，2019，11（13）：130-131.
[5] 林立旺，陈璐瑶，章灿明，陈祖毅，黄育红.新型冠状病毒防控中消毒剂的正确选择.中国消毒学杂志，2020，37（3）：226-227.
[6] 胡雪莲，顾鹏，胡田雨，王强，黄景彬，张蓉，陈艳.冠状病毒的环境抵抗力及消毒剂的选择.重庆医学（网络首发，暂不确定出版年、卷、期和页码）.
[7] 罗嵩，邱天，张淼，杨艳伟，朱英.我国碘类消毒剂产品现状调查.中国消毒学杂志，2018，35（8）：574-575.
[8] 刘小娥，王继红，苏宝凤，苍金荣.聚醇碘醚消毒液杀菌效果及稳定性试验观察.现代检验医学杂志，2008，23（6）：59-60.
[9] 邱洪流，谢琴，谢帆.两种碘伏消毒液杀菌效果比较研究.中国消毒学杂志，2006，3（6）：555-556.
碘伏是在我们日常生活中和医院常用的一类消毒剂，具有广谱杀菌作用，可杀灭细菌繁殖体、真菌、原虫和部分病毒。一般用于皮肤黏膜的消毒，按不同的浓度可用于烫伤、阴道炎、器械浸泡的消毒等。本次实验是以碘和C12-18脂肪醇聚氧乙烯醚络合物为主要成分的消毒剂，有效碘含量为4.0g/L-5.0g/L。我们采用了悬液定量杀菌法进行实验，来观察本品的杀菌效果，结果报告如下。
1.材料与方法
1.1材料
1.1.1材料和设备 碘伏络合剂、中和剂（1%硫代硫酸钠+1%吐温-80的TSB溶液）【1】、胰蛋白胨生理盐水溶液（以下简称TPS）、胰蛋白胨大豆琼脂培养基（以下简称TSA）、胰蛋白胨肉汤培养基（以下简称TSB）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（以下简称SDA）、沙氏葡萄糖液体培养基（以下简称SDB）恒温水浴锅、生物安全柜、移液枪
1.1.2 试验菌株大肠埃希菌（CMCC（B）44102）、白色念珠菌（CMCC（F）98001）、金黄色葡萄球菌（CMCC（B）26003）以上菌种均来自北京三药科技开发公司。
1.2 方法
1.2.1工作菌液制备 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌冻存菌分别接种到100ml的TSB中，在33℃培养箱中培养18h-24h观察生长状态;取白色念珠菌冻存菌接种到100ml的SDB中，在25℃培养箱中培养24h-36h观察生长状态。生长状态良好的菌，放入4℃冰箱中，备用。
1.2.2 试验菌悬液的制备 将备用的工作菌液取出，细菌接种到100ml的TSB中，在33℃培养箱中培养18h-24h;真菌接种到100ml的SDB中，在25℃培养箱中培养24h-36h。将菌液进行活菌计数，并用TPS稀释液稀释配制成含菌量为1×108～5×108cfu/ml。
1.2.3中和剂鉴定试验【2】 将碘伏消毒剂稀释到有效碘含量为2.0g/L-2.5g/L。试验菌悬液、培养基（细菌用TSA培养基、真菌用SDA培养基）、培养时间不同外，其他试验条件均相同。试验组如下。
试验结果符合符合以下全部条件，所测中和剂可判为合格：第1组无试验菌，或仅有极少数试验菌菌落生长;第2组较第1组为多，但较第3、4、5组为少的试验菌菌落生长。3、4、5 组菌数在 1×107 ～ 5×107cfu/ml之间，且组间菌数误差率≦15%;第6组无菌生长，连续3次重复试验结果一致，表明使用中和剂及其使用浓度适宜【2】。实验结果见表1。
1.2.4悬液定量杀菌试验【2】 取0.5ml菌液加入4.5mlTPS稀释液中将菌悬液浓度稀释到1×108 ～ 5×108cfu/ml之间（实际稀释到1×107 ～ 5×107cfu/ml）。消毒剂的浓度为2.0g/L-2.5g/L。试验菌悬液、培养基（细菌用TSA、真菌用SDA）、培养时间不同外，其他试验条件均相同。实验分组如下。
（1）取0.5ml试验菌悬液加入4.5ml的碘伏溶液中分别作用30s、60s、90s，取出0.5ml反应液加到4.5ml的中和剂中，作用10min，取1.0ml接种培养（细菌33℃培养18h-24h，真菌25℃培养24h-36h），每个时间段平行两组。
（2）阳性对照组：用TPS稀释液代替碘伏消毒剂，进行平行试验，平行两组。
（3）取0.5ml试验菌液于平皿中，倒入同批次的培养基进行培养，观察菌落生长状态。
（4）取0.5ml试验菌液到4.5ml的中和剂中，混匀。取1.0ml接种到培养基中培养，观察中和剂中的生长状态。
（5）大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌在33℃培养18h-24h观察;白色念珠菌在25℃培养24h-36h观察。
（6）计算各组的活菌浓度（cfu/ml），换算为对数值（N），并按下式计算杀灭对数值：
杀灭对数值（KL）=对照组平均活菌浓度的对数值（No）-实验组活菌浓度的对数值（Nx）
试验结果见表2。
2.结果
2.1中和剂鉴定试验结果
中和剂鉴定实验结果表明，用含有1%的硫代硫酸钠、1%的吐温-80的TSB溶液做中和剂，其结果符合中和剂的测试结果判定：1组无菌生长;2组生长菌落远高于1组菌落;3组，4组，5组间菌数误差率等于11.95%。所以可用1%的硫代硫酸钠、1%的吐温-80的TSB溶液做中和剂来进行定量杀菌试验。
2.2 悬液定量杀菌试验结果
试验结果表明，用含有效碘4.0g/L-5.0g/L的碘伏消毒液对悬液内大肠埃希菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌不同作用时间的平均杀灭对数分别为7.26，6.05，7.23。
3. 讨论
消毒是切断传染病和感染性疾病传播途径的重要手段，其中化学消毒剂的使用是最简便、最普遍、也是最有效的方法之一，但每次重大传染病流行期间化学消毒剂是使用最多的，很多人对于消毒剂的选择也是盲目的。林立旺等提出疫情防控的消毒剂应具备有效、供应量大、廉价、使用方便、相对毒性较小等特点，不具有这些特点的可不予考虑。符合这些特点的消毒剂一般有过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯、含氯消毒剂和酒精，但是酒精可以用于局部消毒，因属于易燃易爆所以不可以大面积喷洒，也不建议用于口罩表面消毒，会导致口罩降低或丧失过滤效果，碘类消毒剂则更多用于皮肤黏膜的消毒【5】。
碘伏是一种碘与表面活性剂为载体和助溶剂而形成的不定型络合物，单方碘类消毒剂主要有聚醇醚碘和聚维酮碘两大类为主。聚维酮碘是聚乙烯吡咯烷酮与碘的络合物，聚维酮碘是唯一被中国、英国、美国和日本等国药典收载，并准许用于医疗卫生和人体消毒的碘伏。聚维酮碘对皮肤刺激性小，毒性低，作用持久，使用安全简便。聚醇醚碘是以壬基酚聚氧乙烯醚或脂肪醇聚氧乙烯醚作为载体与碘络合而成的碘伏消毒液。试验证明，聚醇醚碘的化学稳定性优于聚维酮碘【6】。
在本次实验中的碘伏为碘和C12-18脂肪醇聚氧乙烯醚络合物为主要有效成分的消毒液，在实验中该碘伏在30s和90s对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的杀灭效果无差异。实验得出该碘伏对细菌和真菌都具有较强的杀灭能力。
参考文献
[1] 唐晨晨，孙巍，王玲，张伟，汪歆悦.常用碘伏制品的殺菌性能研究.江苏预防医学，2019，30（1）：13-14.
[2] 卫生部卫生法制与监督司.消毒技术规范[M].北京，中华人民共和国卫生部.2002：126-132.
[3] 张海林.对比碘伏、苯扎溴铵应用于清创中的临床效果.特别健康，2018，（19）：96-97.
[4] 彭仙，涂方为.碘伏在复发性霉菌性阴道炎中的应用.中国继续医学教育，2019，11（13）：130-131.
[5] 林立旺，陈璐瑶，章灿明，陈祖毅，黄育红.新型冠状病毒防控中消毒剂的正确选择.中国消毒学杂志，2020，37（3）：226-227.
[6] 胡雪莲，顾鹏，胡田雨，王强，黄景彬，张蓉，陈艳.冠状病毒的环境抵抗力及消毒剂的选择.重庆医学（网络首发，暂不确定出版年、卷、期和页码）.
[7] 罗嵩，邱天，张淼，杨艳伟，朱英.我国碘类消毒剂产品现状调查.中国消毒学杂志，2018，35（8）：574-575.
[8] 刘小娥，王继红，苏宝凤，苍金荣.聚醇碘醚消毒液杀菌效果及稳定性试验观察.现代检验医学杂志，2008，23（6）：59-60.
[9] 邱洪流，谢琴，谢帆.两种碘伏消毒液杀菌效果比较研究.中国消毒学杂志，2006，3（6）：555-556.