观察替米沙坦对3T3－L1脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路的影响，探讨替米沙坦延缓2型糖尿病病程的作用机制。
方法诱导3T3－L1前脂肪细胞至80%成熟(对照组)，加入50 ng/ml肿瘤坏死因子α(TNF－α)刺激1 h(TNF－α组)，分别以0.1、5、10 μmol/L替米沙坦加入培养基干预24 h，即T0.1, T5和T10组。应用Western印迹检测PPARγ及其磷酸化水平、细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)表达变化；酶联免疫吸附测定(ELISA)检测培养基中脂联素含量。短发夹RNA(shRNA)沉默未分化3T3－L1的PPARγ，筛选PPARγ丝氨酸突变型3T3－L1细胞系即S273A、S112A、S186A，以进一步确定磷酸化位点。shRNA沉默CDK5，油红O染色、异丙醇萃取检测分化效率，以10 μmol/L替米沙坦干预成熟3T3－L1，Western印迹检测pPPARγ/PPARγ，ELISA检测培养基脂联素含量。
结果TNF－α刺激及替米沙坦干预后各组CDK5表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。与TNF－α组相比，T5组、T10组pPPARγ/PPARγ降低，脂联素含量增加，差异均有统计学意义(均P<0.05)，T0.1组差异均无统计学意义(均P>0.05)。与3T3－L1野生型(WT)相比，S186A、S112A组加入TNF－α后pPPARγ/PPARγ升高，脂联素降低，加入替米沙坦后pPPARγ/PPARγ降低，脂联素含量增加，差异均有统计学意义(均P<0.05)，S273A组pPPARγ/PPARγ、脂联素差异均无统计学意义(均P>0.05)。异丙醇萃取显示沉默CDK5组(shCDK5)与随机对照(shCon)组相比3T3－L1分化差异无统计学意义(P>0.05)，Western印迹显示与shCDK5组相比，shCon组加入替米沙坦后pPPARγ/PPARγ降低，脂联素增加，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论替米沙坦能够缓解因TNF－α刺激导致的PPARγ磷酸化水平升高，上调脂联素含量。CDK5介导了替米沙坦对3T3－L1脂肪细胞PPARγ信号通路的影响。替米沙坦的作用位点为PPARγ第273位丝氨酸，PPARγ第273位丝氨酸上游激酶为CDK5。