【摘 要】
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目的 研究视黄酸(RA)诱导人神经前体细胞(hNPCs)分化的过程中,细胞周期调节蛋白p27Kip1的变化及其调节机制,以掌握hNPCs的增殖分化特性.方法 取原代hNPCs体外培养,在细胞进入
【机 构】
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首都医科大学宣武医院神经变性病学教育部重点实验室,北京,100053;首都医科大学细胞生物学系,北京,100069;北京市神经科学研究所,北京,100069
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目的 研究视黄酸(RA)诱导人神经前体细胞(hNPCs)分化的过程中,细胞周期调节蛋白p27Kip1的变化及其调节机制,以掌握hNPCs的增殖分化特性.方法 取原代hNPCs体外培养,在细胞进入对数生长期时给予RA诱导,在诱导d 3、5、7收集细胞,用流式细胞分析术观察细胞周期的变化、用Western blot法观察p27Kip1及其相关的细胞周期调节蛋白p21 Cipl、cdk2的变化,以及参与p27Kip1泛素-蛋白酶降解途径的重要因子skp2的变化.结果 RA诱导d3,hNPCs细胞G0/G1期的比例由诱导前的65.20%上升至80.72%;而S期的比例由诱导前的28.39%下降到8.62%;p27Kip1蛋白表达在RA诱导d 3增加,并在d 5达到高峰;p21Kipl和cdk2的表达在RA诱导前后变化不明显,但反映cdk2活性的p-cdk2蛋白的表达在RA诱导后明显下降:skp2的表达在RA诱导后明显下降.结论 在RA诱导hNPCs分化的过程中,p27Kip1蛋白泛素降解途径受阻,致使其含量增加,并通过抑制cdk2的活性而发挥了促进hNPCs分化的作用.
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