猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus， PEDV）是一种主要感染仔猪小肠的肠道冠状病毒。本研究旨在建立一种用于PEDV体外研究的仔猪小肠类器官模型。首先从PEDV发病猪场的临床仔猪腹泻样品中分离PEDV并进行全基因组测序，结果显示成功分离一株PEDV，命名为PEDV SD strain。另外采用肠道类器官的培养技术，从10日龄健康仔猪小肠中分离小肠隐窝组织，经过体外培养7 d左右分化成具有肠道隐窝结构的猪小肠类器官，并能进行连续传代。然后将分离的PEDV SD strain感染传代培养的猪小肠道类器官，通过间接免疫荧光试验显示PEDV可以很好地感染猪小肠道类器官，表明成功建立了PEDV感染肠道类器官的模型。猪小肠类器官感染模型可以在体外很好地重现PEDV感染肠道细胞的复杂结构的过程，为深入研究PEDV的致病机制提供一种新的可再生的体外研究模型。