【摘 要】
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目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞在去分化过程中成肌腱细胞分化的潜能。方法采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠骨髓间充质干细胞。用含生长分化因子(GDF-5)的培养液诱导骨髓间充质干细胞去分化后，再用含GDF-5的培养基继续诱导其成肌腱分化。3周后，通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测肌腱相关标记基因如Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、肌
【机 构】
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目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞在去分化过程中成肌腱细胞分化的潜能。
方法采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠骨髓间充质干细胞。用含生长分化因子(GDF-5)的培养液诱导骨髓间充质干细胞去分化后，再用含GDF-5的培养基继续诱导其成肌腱分化。3周后，通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测肌腱相关标记基因如Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、肌腱蛋白(TNC)和碱性螺旋环-螺旋转录因子(Scx)和肌腱相关标记蛋白如Col Ⅰ、TNC和腱调蛋白(Tenomodulin)的表达。结果以均数±标准差表示。多组间数据的比较采用单因素方差分析，两组间比较采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
结果RT-PCR结果显示：实验组Scx、Col Ⅰ、Col Ⅲ、TNC基因表达量为0.635±0.557、0.590±0.020、0.447±0.063、0.613±0.061，显著高于诱导分化组(0.416±0.054、0.406±0.173、0.294±0.013、0.373±0.042，t＝17.857，P<0.05；t＝12.948，P<0.05；t＝7.747，P<0.05；t＝－5.212，P<0.05)，对照组(0.197±0.019、0.201±0.014、0.216±0.037、0.190±0.014，t＝31.077，P<0.05；t＝14.419，P<0.05；t＝15.054，P<0.05；t＝8.013，P<0.05)。Western blot检测结果显示：实验组Col Ⅰ、TNC和Tenomodulin的蛋白表达分别为1.705±0.159、1.587±0.018、1.616±0.019，显著高于诱导分化组(1.160±0.018、1.164±0.016、1.092±0.022，t＝4.825，P<0.05；t＝17.395，P<0.05；t＝3.961，P<0.05)，对照组(0.643±0.047、0.441±0.02l、0.673±0.015，t＝13.299，P<0.05；t＝37.618，P<0.05；t＝9.349，P<0.05)。
结论GDF-5能诱导骨髓间充质干细胞成肌腱细胞分化，且去分化过程能提高骨髓间充质干细胞腱系分化的能力。
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